肿瘤发生肾虚端粒机制研究.pdf

摘 要 近年来，大量的临床研究结果证实，采用中医药辨证治疗肿瘤，能延 长带瘤病人的生存期，提高病人的生活质量，改善临床症状，与放疗、化 疗方案配合运用具有减毒增效的作用。以综合的临床疗效优势，我国肿瘤 研究工作者提出了肿瘤疗效的综合评价体系，认为在肿瘤防治的临床实践 中，应以人为本，容忍带瘤生存，注重延长病人的生存期，提高生活质量， 改善临床症状。这一新的医疗理念，是对以手术、放疗、化疗为主的以瘤 体大小变化作为唯一标准衡量肿瘤疗效的评价体系的挑战，也使传统的以 主观指标为主的中医临床疗效评价体系得以客观化。良好的临床疗效使众 多的肿瘤患者从中受益，也引起了国内外肿瘤研究者的极大兴趣。因此， 试图从天然药物中寻找抗肿瘤新药的研究成了一个新的热点。最先进的科 学技术、最精密的实验仪器设备迅速被运用于中医药的研究中。筛选到了 不少具有抗肿瘤功效的中草药，也从中草药中提取出了不少具有抗肿瘤作 用的活性成分，中医药抗肿瘤的机制也得到了一一证实。然而，采用现代 科技手段研究抗肿瘤中医药的结果，除了从另一个侧面更进一步证实中医 药具有多层面、多环节、多靶点的全方位抗癌抑癌的综合疗效外，既未见 到其对中、西医理论的促进作用，也未见到其对中、西医临床的指导作用， 亦未见到其有形成新的医学理论的迹象。究其原因：1，中医临床注重的 是因地因时因人制宜的个性化动态治疗方案，而西医实行的主要是群体化 静态治疗方案；2，西医追求的是药物单体的药理功效，而中药对肿瘤机 体起作用的是复方配伍和复合成分；3，西医临床以病为重，注重杀灭癌 细胞，而中医以人为本，注重保持机体元气，容忍长期带瘤生存。由此可 见，离开了中医理论指导下的任何研究，无论多先进、多科学，其结果必 将陷入与临床脱离，与原有理论偏移，最终使学科退化的困境。要研究中 医药抗肿瘤的机制，必须首先明确肿瘤发生的中医机制。 目的 1．用科学的实验数据把肿瘤发生的肾虚机制内涵表达出来。 2．建立具有科学属性的中医抗肿瘤理论，科学有效地指导抗肿瘤的临床 实践和实验研究。 3．从细胞生物学和分子生物学水平丰富和发展中医理论。 方法与结果 1．通过观察右归饮含药血清对A549人肺腺癌细胞形态与功能、端粒动力 学、端粒酶、端锚酶、P53基因的影响探讨肿瘤发生的肾虚端粒机制。 2．运用倒置显微镜观察A549人肺腺癌细胞形态、传代的变化，采用 【3H】-TdR摄取试验和X-Gal转染试验检测衰老细胞，结果显示：经不 同浓度右归饮含药血清处理后各组细胞对[3H]-TdR的摄取率逐渐降 低，经7次传代后，30*A右归饮含药血清组的摄取率降至：(6．78± (84．84±4．86)％，各组比较，差 ±2．59)％，而对照组的摄取率为： 异显著(P0．01)；各组细胞转染X-Gal的效率逐渐提高，经7次传 10％、2 ％，而对照组为： (6．20±0．89)％，各组比较，差异显著(P0．01)； 各组细胞每次传代时间逐渐延长，传代次数逐渐减少，衰老细胞逐渐 7．00-I-O．6 5．5 第1 3代和1 0±0．84代，细胞传代终止并在显微镜下见 衰老凋亡细胞。 3．采用定量荧光原位杂交法(Q-FISH)上流式细胞仪检测每一代细胞端 粒长度，结果显示：经不同浓度右归饮含药血清处理后各组细胞端粒 长度逐渐缩短，细胞传代丢失的端粒长度逐渐增加，30％右归饮含药血 0％、2 2kb，1 o％组分别为 清组平均每次传代丢失的端粒长度达1．29±0．1 0．53±0．1 lkb和0．57±0．03kb。 性，结果显示：经不同浓度右归饮含药血清处理后各组端粒酶活性逐 渐降低，在第7代培养细胞中，30％右归饮含药血清组端粒酶活性为 36．44±2．49，10％、2 0％组分别为64．75±2．63和62．50±2．64，而对 照组为87．50±3．05。 5．运用WesternBlot反应检测端锚酶活性，结果显示：经不同浓度右归 饮含药血清处理后各组端锚酶活性