三维培养技术的研究进展及其在骨肿瘤研究中的应用.pdfVIP

．专题综论． 三维培养技术的研究进展及其在骨肿瘤 研究中的应用 左冬青蔡郑东 【主题词】肿瘤；骨肿瘤；三维培养；研究进展 【Subjectwords】Neoplasms；Boneneoplasms；Three—dimensionalculture；Researchprogress 三维培养技术是相对传统二维平面培养的一种 期药物动力学性能分析，证实该组织模型能有效应 培养技术，通过提供相应的细胞基质，构建细胞、组 用于前期药物试验的药动学分析及预测小分子靶向 织或器官的模拟三维微环境，从而实现细胞与组织 阻断剂的疗效中。Nguyen等。列采用重组基质基底 基质细胞相互作用的培养模式。传统的二维平面培 膜(rBM3．D)及二维培养模式分别培养人乳腺癌 养最主要的缺陷是缺少细胞基质，不能形成有效的 空间结构，无法模拟正常物质代谢运输及内分泌作 乳腺癌细胞形态发生标志的miR-200家族较二维培 用。三维培养技术在准确再现肿瘤立体结构的同 养明显高表达。但器官组织培养同样面l临一些应用 时，将为肿瘤研究者进行肿瘤靶向治疗研究提供更 的障碍，如细小标本获取的问题以及伦理审批的障 精确的研究对象，促进研究者对肿瘤细胞相关的基 碍。此外，标本的大小为数毫米，常导致物质大量运 质细胞信号通路及基因表达模型深入研究。此外， 输到中心区域受限，影响组织生存能力。 三维培养技术也为罕见肿瘤患者带来福音，三维培 胚胎或完整动物培养、器官组织切片培养是三 养技术的应用可以消除因罕见肿瘤的低发病率而无 维培养发展的最终方向，但目前的相关技术条件尚 法实行大规模I、Ⅱ期药物临床试验的困扰¨引。 不成熟，组织或者器官标本获取困难，更需要获得伦 一、三维培养技术的分类 理审批。 依据组织学分级，可以大致将三维培养技术分 3．三维细胞培养：目前应用最广泛的三维细胞 为胚胎或完整动物培养、器官组织切片培养和三维 培养模型大致分为两大类：(1)传统的体外肿瘤球 细胞培养。 培养：包括自发性聚集法、液体覆盖法、悬滴法、旋转 1．胚胎或完整动物培养：胚胎可以提供细胞起 烧瓶和旋转生物发生器法。前3种方法的特点是原 源组织的原始生理微环境。果蝇、青锵及石斑鱼等 理简单，操作方便，易于构建，费用较低。其主要原 低等动物胚胎的培养，其微环境参数设置可以有一 理就是减少细胞与培养器皿的黏附，使细胞与细胞 些灵活的变动。但哺乳类动物(如小鼠)胚胎培养， 间的黏附力大于细胞与培养器皿之间的黏附力，进 在实验中需要严格控制温度和氧气的供应，这也是 而产生细胞球形聚集。自发性聚集培养是依靠少数 目前进行哺乳类动物胚胎培养研究的技术障碍之 肿瘤细胞的自发聚集能力而形成肿瘤细胞球，而无 一。另外，哺乳类胚胎的获取及伦理的审批也很重 需借助特殊装置，操作最简便，但该模型培养的肿瘤 要。目前，肿瘤发生相关的血管生成研究及药物毒 球大小不均，故不利于实验的标准化和广泛应用。 性研究已经证实了胚胎培养的可行性∞J。 液体覆盖方法常以琼脂、人工基底膜胶或其他胶原 2．器官组织切片培养：通常取新鲜的小块实验 作为基底物，细胞在基底物上会发生彼此迁移并聚 标本，其大小一般为数毫米，进行体外培养。Vaira集成球形体。该方法易于构建，同时能在静态培养 等M1采用器官组织切片模型进行人类肿瘤临床前 环境下模拟肿瘤生长状态和肿瘤与基质之间的相互 作用。旋转烧瓶和旋转生物发生器法则是通过装置 DOI：10．3760／cma．j．issn．0253-3766．2013．09．