镉锌菲复合污染对土壤微生物分子生态毒理效应.docVIP

上海交通大学硕士学位论文  中文摘要  镉锌菲复合污染对土壤微生物的分子生态毒理效应 摘 要 土壤是环境的重要组成部分，易接纳各种污染物，开展土壤 环境复合污染研究，对于正确评价复合污染条件下污染物质迁移 转化的特征，帮助人们采取合理的诊治措施，防治土壤污染具有 十分重要的理论和实践意义。 本文选择了土壤环境中普遍存在的重金属（镉和锌）和多环 芳烃（菲）作为供试污染物，在室内模拟条件下，对镉、锌和菲 复合污染分子生态毒理效应进行了研究，以期为土壤环境中重金 属－有机复合污染研究提供科学依据，主要研究结果如下： 1．不同提取方法与土壤微生物总 DNA 提取总量、纯度有 关。采用酶解和化学相结合的方法，不仅 DNA 提取量高而且纯度 也较高。采用 touching-down-PCR 法，可有效提高用于进行变性梯 度凝胶电泳(DGGE)分子指纹分析的特异性 16S rDNA V3 区扩增产 物的产量。 2．以镉、锌、菲为目标污染物，采用 RAPD 技术，研究了土 壤环境中重金属之间以及重金属和多环芳烃之间复合污染对土壤 i 上海交通大学硕士学位论文  中文摘要  微生物 DNA 序列的影响。结果表明，镉、锌、菲复合污染可引起 土壤微生物 DNA 序列发生变化，其中，锌－菲复合污染与单一污 染差异较小，而镉－菲复合污染与单一污染差异较大。随着培养 时间的延长，镉－菲复合污染土壤微生物群落 DNA 扩增条带数增 加，对土壤微生物 DNA 序列的影响增大。培养 15 d，土壤微生物 群落 DNA 序列变化大小依次为：菲镉镉＋菲对照，培养 30 d 时为：镉＋菲 镉 菲对照。 3．通过 16S rDNA V3 可变区序列作 PCR 扩增、变性梯度凝 胶电泳(DGGE)，对镉、锌、菲复合污染土壤微生物基因多样性进 行了研究，结果表明，镉、锌与菲复合污染土壤中，重金属对菲 降解（耐受）菌具有毒作用，可导致 DGGE 指纹图谱中的特异性 条带强度减弱。随着培养时间的延长，复合污染对土壤微生物 DNA 序列的影响加剧，种群数量受到抑制。其中，镉－菲与锌－菲复 合污染早期对土壤微生物群落影响差异大于后期。 关键词：重金属，多环芳烃，复合污染，DGGE，RAPD，分子生 态毒理效应 ii 上海交通大学硕士学位论文  中文摘要  MOLECULAR ECOTOXICOLOGICAL EFFECTS OF COMBINED POLLUTION AMONGE CADMIUM，ZINC AND PHENANTHRENE ABSTRACT With the economic development， more and more pollutants enter the soil environment and it is estimated that more than 90 % of the total burden of pollutants residues in the surface soils. Heavy metals (HM) and organic pollutants (PAHs or pesticide) are frequently found together as contaminants in soils and have attracted much attention in recent decades. However， they are mostly concentrated on the effect of a single organic pollutants and heavy metals. In fact， contaminated soils usually contain mixtures rather than a pure substance in the real environment. It is very important to investigate the compound pollution between heavy metal and organic pollutant for the management and diagnosis of soil pollution. In this paper ， molecular ecotoxicological effects of combined pollution amonge cadmium， zinc and phenanthrene were studied. The results were showed as follow: 1. Three different methods of the DNA extr