异位灶趋化因子TECK与其受体CCR9异常调控民致子宫内膜异位症分子机制.pdfVIP

参考文献……………………………………………………………………………68 致谢…………………………………………………………………………………77 附录…………………………………………………………………………………78 综述…………………………………………………………………………………82 中文摘要 异位灶趋化因子TECK与其受体CCR9异常调控 导致子宫内膜异位症的分子机制 中文摘要 在子宫内膜异位症发病机制中，Sampson的经血逆流学说已获得普遍认可。 正常情况下约有50％一-90％的育龄妇女发生经血逆流，但只有6．2％～8．2％罹患 EMs。因此，EMs患者可能存在浆膜免疫异常，导致难以清除逆流的内膜碎屑。 已有研究证据表明，EMs患者的外周及腹腔细胞免疫功能异常调控，降低了对 异位子宫内膜的免疫监视、识别和清除，将促进子宫内膜的异位种植。 在子宫内膜异位症的发生和发展过程中，多种免疫细胞被募集到腹膜腔内， 特别是单核巨噬细胞、T细胞亚群；且功能发生异常改变。调节性T细胞在维持 免疫耐受中发挥至关重要的调节作用，在体内被趋化因子一趋化因子受体趋化到 靶器官及组织，形成有利于免疫耐受的特殊免疫微环境。由于趋化因子及其受体 TECl；汽CR9在EMT在位内膜及异位内膜异常表达，故可能参与EMT的发生与 发展。目前已知：CCR9与TECK的相互作用激活了CD4+T细胞多种信号通路： MAPK(Mitogen-aetivatedprotein kinase)、蛋 kin弱e synthase 白激酶B、GSK-31B(Glyeogen313)以及转录因子NF．KB，在促进T 细胞的存活和增殖以及逃避Fas介导的细胞凋亡中起重要调控作用。 EMs的发病受多种因素影响：一方面，EMs是一种雌激素依赖性疾病；另 一方面，环境污染物参与EMs的发病。含碳和氯燃料所产生的二嗯英(TCDD) 是全球普遍存在的最严重的大气污染物，可在大气中长期稳定存在。许多研究证 据表明，TCDD与EMs的发病具有相关性。TCDD的亲脂特性决定其不易从尿 中排泄而在体内脂肪中长期堆积，作用机制与甾体激素类似，通过与细胞内特异 受体结合形成复合物，作为转录因子调控多种蛋白质分子表达。TCDD具有抗雌 激素和雌激素样双重作用特性；依据年龄、月经周期、组织和其它因素变化所致 的体内雌激素水平，决定着TCDD发挥雌激素效应，或抗雌激素效应。 本研究假设是：环境污染物TCDD与体内雌激素协同作用，导致腹腔内分泌 及免疫微环境改变。因此，我们通过体外构建异位灶模型，探索17pE2和TCDD 调节性T细胞进入异位灶微环境及其在异位灶发生与发展中的调节作用。 中文摘要 1、趋化因子TECK及其受体CCR9在异位灶微环境的表达 本研究应用RT-PCR分析发现，异位灶CCR9的转录水平明显高于子宫内膜 异位症患者的在位内膜及正常生育期妇女的子宫内膜。FCM方法检测子宫内膜 异位症相关靶细胞CCR9的蛋白表达水平。ELISA方法检测子宫内膜异位症患者 腹腔液TECK浓度及内异症相关细胞单独培养及共培养体系上清TECK的分泌。 和HPMC．U937共培养体系分泌的TECK；三者共培养进一步促进TECK的分泌， 其中以三者直接接触共培养(U-E—H)最高；其分泌水平远远超过三种细胞单独 培养的TECK分泌总量。在三种细胞直接或间接共培养不同组合中， U937／ESC．HPMC体系的TECK分泌水平。这些结果提示，异位灶关联细胞共培 养明显促进趋化因子TECK的分泌，可能参与子宫内膜异位症的发病。 及其受体CCR9表达的调控作用 通过异位灶关联细胞直接接触或间接接触共培养体系不同组合，观察1713一 雌二醇及二嗯英对共培养体系TECK／CCR9表达的调控作用。使用ELISA方法 检测TECK的分泌；应用流式细胞术分析CCR9的表达。 的升高， U937分泌TECK。TCDD抑制U937细胞体外分泌TECK。l