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间充质干细胞对树突状细胞体外分化成熟影响的实验研究 中文摘要 中文摘要 树突状细胞(dendritic cells，APCs)。由于表达丰富的协同刺激分子以及分泌多种具有免疫活性 presenting 的细胞因子，DCs可以有效刺激初始T细胞活化。DCs的分化发育过程包括未成熟 和成熟两个阶段，而DCs的生物学功能也与其成熟程度密切相关。在免疫稳态时， 未成熟DCs(immatureDCs，iDCs)通过不断摄取死细胞相关产物维持细胞正常的 更新换代。当缺乏炎症因子时，这些iDCs表达较低水平的协同刺激分子，从而诱 导引流淋巴结内T细胞无能、凋亡或调节性T细胞的产生。当感染发生时，iDCs在 抗原和炎症因子的刺激下成熟，进入淋巴组织刺激初始或静息T细胞活化，从而介 导效应T细胞应答。总之，DCs的功能主要依赖于细胞活化成熟的程度，不同亚群 的iDCs参与诱导和维持外周耐受，而最终发育成熟的DCs可有效地促进效应T细胞 的产生。 由于基因缺损、移植等原因，DCs的成熟过程常常被打乱，从而可能产生自身 versushost 免疫性疾病或移植物抗宿主病(graft disease，GVHD)。有报道显示，在 系统性红斑狼疮(systemiclupus 缓慢活化。另外，在小鼠疾病模型中应用未活化DCs可显著改善急性GVHD的恶性 程度。因此，调节DCs的活化程度有可能成为治愈这些疾病的有效手段。 stem 间充质干细胞(mesenchymalcells，MSCs)具有强大的调节功能，在疾病 治疗方面的应用前景让人期待。目前研究发现，MSCs不但可以抑锘IJCD8+细胞毒性 T killer T细胞(cytotoxiclymphocytes，CTLs)和自然杀伤细胞(naturecells，NKs) 的活化，也能抑制细胞或非特异性丝裂原介导的T细胞增殖。虽然MSCs对许多免 疫细胞都具有直接的负调控效应，但MSCs对免疫应答的起始过程枷Cs的成熟 ——是否也具有免疫调节功能还不清楚。 本实验分为两个部分，分别研究小鼠和人MSCs对DCs分化成熟的影响。在第 一部分中，小鼠骨髓(bone d可 d。 结果发现，对照组DCs悬浮生长并大量聚集成团，细胞表面出现树枝样突起，呈典 型的成熟DCs形态。而共培养组DCs散在分布，细胞呈圆形，无树枝样突起；细胞 间充质干细胞对树突状细胞体外分化成熟影响的实验研究 中文摘要 表型检测发现，共培养组DCs表面CDl 增；此外，共培养组DCs束O激脾细胞增殖的能力也明显下降，且伴随IFN．Y和IL．10 分泌的减少。 ． 在第二部分中，首先从人胎盘分离得到MSCs并进行鉴定，随后分别研究了胎 derived blood，PB)和脐 盘源MSCs(placentaMSCs，PMSCs)对外周血(peripheral cord 血(umbilical 酶消化、贴壁和传代培养可获得人PMSCs，运用倒置显微镜和流式细胞仪进行细 制，而CDl4的表达则被上调。另外，PB单核源DCs刺激淋巴细胞增殖的能力也受 到抑制。 综上所述，本实验表明MSCs可以在细胞形态、表型、刺激淋巴细胞增殖以及 细胞因子分泌四个方面抑制DCs的成熟。本结果为进一步研究MSCs免疫调节DCs 的分子机制提供了实验基础，也为临床治疗各种疾病带来启示和帮助。 关键词：小鼠间充质干细胞株；胎盘源间充质干细胞；树突状细胞；移植物 抗宿主病；系统性红斑狼疮 作 者：李