聚合酶链反应-PCR技术的诞生和发展.pptVIP

聚合酶链反应Polymerase chain reaction, PCR 一、什么是PCR？ PCR是一种模拟天然DNA复制的体外扩增DNA序列的技术，用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。 二、PCR技术的诞生和发展 1869年 Friedrich Miescher 发现DNA。 1953年 Waston和Crick提出了DNA双螺旋结构。 1958年 Matthew Meselson和Franklin Stahl论证 了DNA的半保留复制方式。 1960s中期从细胞中分离基因 。 1960年代末和70年代初基因的体外分离技术。 1985年 美国PE-cetus公司的人类遗传研究室的 mullis等人发明了PCR技术。 三、PCR技术的原理 加热使双链DNA解开螺旋 ↓ 在退火温度条件下引物同模板DNA杂交 ↓ 在Taq DNA聚合酶，dNTPs，Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物 ↓ 重复上述变性→退火→引物延伸过程至25-40个循环。靶序列被扩增上百万倍， 达到体外扩增核酸序列的目的。 PCR原理示意图 四、PCR反应基本条件 PCR反应基本要素： 模板DNA、引物、酶、 d