高粱籽粒多酚氧化酶基因的表达及酶活性检测.pdfVIP

中文摘要 多酚氧化酶(以下简称PPO)是高粱褐化的主要原因之一。PPO在植物的 生长中起到重要的作用，具有重要的抗逆性，又影响食品的品质。但是关于高 粱中勋即D的分子信息却知之甚少。本研究通过分析高粱品系BTx623中的全 基因组信息，鉴定出8条鼬即D。这8条勋即D分别定位在高粱3号染色体 个内含子，勋PPD3和4含有2个内含二子。这些勋即D的预测蛋白(PP01．8) 都包含两个核基因编码的完整的铜离子结构域。在铜离子结构域中都含有酶活 性结构氨基酸，酪氨酸修饰和其他互作氨基酸残基。勋即∞．7中含有类囊体转 移结构域，然而在舶胛D，和8中预测到将目的蛋白定位在特定部位的N．端信 号肽。系统进化树分析，发现勋尸PD与玉米的即D亲源关系较近。通过线性分 析我们能够鉴定出勋即02．8在玉米中的同源基因。还有，我们发现鼬即D5是 高粱勋即D家族中的重要成员之一，它主要在高粱两个不同基因型籽粒发育的 早期过程中表达。另外PPO活性在两个高粱品系的籽粒发育过程中都具有明显 的变化，表现出在早期酶活性高，晚期活性低的特征。我们对高粱鼬即。与玉 米即D具有较近的系统进化关系，以及在籽粒发育过程中的表达模式的研究， 为进一步研究肋尸P0在高粱中的功能奠定了基础。 关键词：多酚氧化酶；基因家族；系统进化树分析；表达模式；籽粒发育； 高粱 ABSTRACT rolesi11 and to Polyphenoloxidase(PPO)playsmunipIe plantgr0、Ⅳth responses enViromnemalhas innuenceson stmluli，arld traits．HoweVer， importam cropquality thereisStiU1ittlemolecularinformationonPPD in genessorghum．Here，by the ofthe 1ine diStitlct sorghum analyz洫gcompletegenomesequence BTx623，e逸ht 胛D as．妨即D』to identified．Themembers genemembers，designated8，were eight werelocatedon c11romosomes and sorghum 3(鼬，垆D』and2)，6(鼢尸PD34)，7 to contained to (鼬即D57)or10(舶即0∽，aI】d zero(舶即068)，one(鼢即oJ，2 and and deduced to8)all 5)ortwo(：妨即D34)introns．Theirproteins(SbPP01 conta访edannactbinuclearcenter for copperrequiredenZymeacti诎y，thetyrosme in to6 Inotifandits residuesinvolVedstructuralmaintenance．SbPP02 interactillg