骨肉瘤局部治疗基础研究.pdf

 论文题目:骨肉瘤局部治疗基础研究 中文摘要 骨肉瘤是常见的恶性肿瘤，自从02世纪07年代新辅助化疗的应用大大改善骨 肉瘤患者的预后。目前，新辅助化疗已成为骨肉瘤标准治疗的重要部分，但是大剂 量全身化疗可产生严重的毒副作用，因此抗肿瘤药物局部治疗得到重视。抗肿瘤药 物复合磷酸钙骨水泥是局部药物治疗的一个新选择，而应用何种药物及如何应用仍 有争议。足叶乙贰和异环磷酞胺都是广谱抗肿瘤药物，由于给药方法和方案不同， 其临床疗效不尽相同。本试验的目的一是研究与磷酸钙骨水泥复合的抗肿瘤药物对 骨肉瘤细胞的毒性，探讨足叶乙贰和异环磷酞胺对骨肉瘤细胞株(UZ一05细胞)的毒性 作用和作用机制。试验目的二是抗肿瘤药物复合磷酸钙骨水泥性能的影响。 本实验分两部分:第一部分是研究准备与磷酸钙骨水泥进行复合的抗肿瘤药物 对骨肉瘤细胞的毒性。它包括三个实验。实验一是用MTT 比色法检测不同浓度梯度 足叶乙试和异环磷酞胺作用UZ一05细胞42、48、27、96h后的细胞活性，结果显示 足叶乙贰和异环磷酞胺对骨肉瘤细胞有明显的生长抑制作用，并且存在一定范围内 时间依赖和剂量依赖关系，二者合用有增效作用。实验二是应用流式细胞仪检测足 叶乙贰和异环磷酞胺作用UZ一05细胞后细胞凋亡情况。结果显示药物作用后细胞凋 亡明显增加，足叶乙贰和异环磷酞胺可以诱导骨肉瘤细胞凋亡。实验三是应用电镜 观察药物作用后骨肉瘤细胞形态改变。结果显示药物作用后骨肉瘤细胞出现典型的 凋亡改变，透视电镜可见细胞核仁消失，染色质浓缩聚集核膜下。第一部分实验提 示CPC所载的足叶乙贰和异环磷酞胺对骨肉瘤细胞有杀伤作用，细胞毒作用与促细 胞凋亡有关。第二部分是抗肿瘤药物复合磷酸钙骨水泥性能的研究，足叶乙贰和异 环磷酞胺复合磷酸钙骨水泥对CPC凝结时间、抗压强度、CPC微结构的改变和体外 缓释的影响。结果显示药物的引入能影响CPC 的性能，VP16引入对CPC 固化及材料 3 .一 .一 一 一 ‘一 - .， 目.碑 一 ‘一 一 - 一 一 ~ .一 一 一 一 ，一 ~ .- - 一 - ‘~ ， 目~ 性能产生负面的影响，凝结时间明显延长，抗压强度下降。而工FO的引入未对CPC 固化及材料性能产生负面的影响，CPC的凝结时间无明显延长，抗压强度反而增加。 该体系的药物缓释符合Higuchi模型。 以上结果提示抗肿瘤药物复合磷酸钙骨水泥能应用于骨肉瘤的局部治疗。 关键词: 骨肉瘤 化疗 U2-OS细胞株 流式细胞术 电镜 细胞凋亡 磷酸钙骨水泥 骨修复 药物缓释 4 TheBasicResearchontheLocalTreatmentoftheOsteosarcoma Abstract Osteosarcomaisakindofcommonmalignanttumor.Theprognosishasbeengreatly improved with new adjuvantchemotherapy since 1970s.Now new adjuvant chemotherapyhasbecomeanimportantpartofstandardtherapyinosteosarcoma,but high-dosegeneralchemotherapyhas severalundesirablesideeffectsandlocal chemotherapyhasbeenmoreused.ThecompoundantitumorCPC(CAC)isanewchoice inlocaltreatment;thereisadisputeinhowtouseandwhichtobeused.Etoposideand ifosfamidewereusedtotreattumorinadjuvantchemotherapyregimenandtheircurative