汉黄芩素在大鼠体内代谢与药物动力学分析方法研究.pdfVIP

汉黄芩素在大鼠体内的代谢与药物动力学 分析方法研究 摘要 汉黄芩素是从唇形科草本植物黄芩的干燥根中提取出的～种活性成 分，具有黄酮类化合物的结构特征。广泛用于治疗发热、咳嗽、发炎等症， 临床疗效确切。近年来研究表明，该类化合物对肿瘤细胞株的增殖具有抑 制作用，这一发现进一步拓宽了其应用前景。本文建立了测定大鼠血浆中 汉黄芩素浓度的液相色谱一串联质谱 LC／MS／MS 法，研究了汉黄芩索在 大鼠体内的吸收动力学性质，并采用液相色谱．电喷雾离子阱质谱 LC，EsI—MS“ 技术鉴定了其在大鼠体内的代谢特征，从而有助于更加 深入地了解黄酮类化合物在体内代谢转化的一般规律，为该类药物的进一 步开发研究提供了科学依据。 一、汉黄芩素在大鼠体内的吸收动力学研究 f首次建立了测定大鼠血浆中汉黄芩素的液相色谱一串联质谱法。以异 黄酮类化合物葛根黄豆苷元为内标，血浆样品经液．液萃取后，在c18反相 色谱柱上进行色谱分离，采用三重四极杆串联质谱检测，使用大气压化学 电离源 APcI ，在正离子条件下以选择反应监测 SRM 方式进行扫描， 284．8专m／z 用于定量分析的离子反应分别为：m／z 269．5 汉黄芩素 和 m／z 198．5 内标葛根黄豆昔元 。在低、高两个浓度区间下， 254．7一m／z 线性范围分别为0．25—20．0 ng／mL，定量下限分别为 ng／n1L和2．5—1000．0 O．25 ne／mL。以质控样品 QC 计算，在以上两个浓度区间 ng／mL和2．5 下，该分析方法的日内RSD分别为2．2％～13％和1．1％～8．8％，日间RSD 分别为5．9％一7．3％和5．5％～7．4％，RE分别为一0．3％一1．3％和一0．3％一1．O％。 采用本法研究了汉黄芩素在大鼠体内的吸收动力学特点。 按5mg／kg剂量，分别以灌胃和静脉注射两种途径给药，血浆样品经 B．葡糖苷酸酶水解处理，测定酶水解前、后不同时刻的血样，即得汉黄芩 素原形及总量 原形+结合型 的浓度，求算药动学参数。结果表明，汉 dl● I●I 黄芩素口服吸收迅速，血浆中原形及总量的C。。分别为24．0 ng／mL和 797．2 ng／mL，用梯形法计算所得的药一时曲线下面积AUC№分别为100．3 ng‘h／mL和6836．1 ng’h／mL；静脉给药后，血浆中药物浓度迅速下降，其 药-时过程符合二室模型，经梯形法计算所得的药．时曲线下面积彳嘲。 分别为1161．7 ng‘h／mL和14147．5ng·h／mL。比较灌胃和静脉给药后汉黄 芩素原形及总量的AUCo．。值可得，汉黄芩素原形及总量的绝对生物利用 度分别为8．6％和48．3％。由灌胃给药后血浆中汉黄芩素原形及总量的 Auco。数值可得，该给药途径下汉黄芩素的葡糖苷酸结合率为98．5％；由 静脉给药后血浆中汉黄芩素原形及总量的一L翰．。数值可得，该给药途径 下汉黄芩素的葡糖苷酸结合率为91．8％。y 二、汉黄芩紊在大鼠尿粪中代谢产物的研究 f采用液相色谱一电喷雾离子阱质谱技术，对汉黄芩素在大鼠尿样及粪 便吟的代谢产物进行分析鉴定。生物样品经固相萃取处理后，采用 LC／ESI—MS“法检测，结果表明，汉黄