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仪器检测原理 血凝常规检测 血浆或稀释血浆 (37°C孵育) + 试剂 (预加热 37°C) - 纤维凝块形成 - 纤维凝块形成所需时间 纤维蛋白凝块检测 所有的凝固反应均为纤维凝块形成过程的检测 如: PT, APTT, Fibrinogen Clauss, 因子检测, 等 免疫比浊法，Ｄ－二聚体检测　 凝固法检测史 手工法检测 反应在试管内发生(37° C水) 凝块形成，操作人员肉眼可见 操作人员记录时间 持续检测光密度变化 (透射法或散射法） 凝固时间由数学运算法则决定 (域值, 第一演算法,第二演算法等) 仪器的运算法则决定反应时间 最经典的运算法则: 阈值，正好能产生特定效应的界限（反应浊度的变化) 第一法则 (反应速度) 第二法则 (反应加速度) 凝固法、发色底物法、免疫比浊法原理 凝固法、发色底物法、免疫比浊法原理 光学检测法 散射比浊 透射比浊 测量浊度的变化 它并不是一种由于颜色变化引起的吸收值的变化（区别于发色底物法) 为了避免干扰（胆红素，血红蛋白），通常选择高波长进行检测 反应曲线 APTT与PT实验原理 系统激活剂(如：鞣华酸，高岭土) 磷脂混合物 CaCl2 纤维蛋白的形成过程 纤维蛋白的形成过程 监察凝血功能，手术前检测 预防血栓形成，独立的危险因素，抗凝治疗 肿瘤病人化疗、转移的指标之一 DIC检测 血栓溶栓及降纤药用量的监测 FIB增高促进血栓形成的作用机理： 1）增高血浆和全血粘度，参与动脉粥样硬化 2) 改变血液内皮细胞的切变应力 3）中和游离的纤溶酶原 4）直接与血小板膜蛋白IIb/IIIa结合，介导血小板聚集 ACL系列凝血仪纤维蛋白原检测 PT衍生纤维蛋白原（PT based FIB ） Clauss法纤维蛋白原（Clauss FIB） FIB的检测方法 PT based FIB的基本原理 基于PT反应曲线光学差值与FIB浓度的线性关系 FIB的检测方法 Clauss法FIB的基本原理 FIB方法使用建议 首选Clauss方法—NCCLS推荐 如考虑测试成本，可选用PT based FIB做常规筛查，超出200-400mg/dL范围样品及OAT病人样品用Clauss法复查 Clause 方法与PT 衍生法结果比较口服抗凝药病人 标本: 411 正常人, 50 位口服抗凝药病人 方法: Clauss 和PT 衍生法 结果: Clauss PT derived 正常人 320±124 289±126 (mg/dl) 口服抗凝药病人421±154 487±194 (mg/dl) 口服抗凝药病人PT 衍生法结果比 Clause 法高24%  Clauss 方法与PT 衍生法结果比较纤维蛋白原异常病人 XIIIa FXIIIa stabilises fibrin by introducing covalent bonds 3.通过铰链形成稳定的纤维蛋白 纤维蛋白的形成过程 纤维蛋白原检测的临床意义 纤维蛋白原检测的临床意义 OD OD1 OD2 OD3 250mg/dl 125mg/dl 62mg/dl OD3 OD2 OD1 0 62 125 250 mg/dl[FIB] 时间 OD PT PT PT OD x [FIB] 浓度 时间:S 浓度：mg/dL 5 2 5 105 10 15 20 Intrinsic Extrinsic Common 浓缩凝血酶 纤维蛋白原 纤维蛋白 ［FIB］∝凝固时间 1 Instrumentation Laboratory 血凝检测原理 凝固法(凝块形成) 发色底物法 (吸光度变化) 免疫比浊法 (乳胶粘合) 手工法检测 光学法检测 光电测定器 衍射光栅 单波长光线 反应杯 长寿命的二极管光源 ACL 2007000 ACL Top ACL Elite ACL Advance ACL Elite Pro 凝固法 660 880 671 发色底物法 405 405 405 免疫比浊法 405 405 405 or 671 Light source Sensor 90° Sensor Light source 180° cuvette cuvette 凝固反应 光学检测法 胆红素 血红蛋白 乳糜 胆红素，血红蛋