银杏叶提取物对小鼠离体小肠平滑肌收缩特性的影响.pptVIP

银杏Ginkgo biloba Lin，别名公孙树,系银杏科。银 杏属落叶乔木，是中国的特种植物，70﹪的银杏资源产于中国。 银杏提取物(Extract of Ginkgo biloba,Egb)作为一种天然药物，其药性温和，疗效肯定，毒副作用极小，其单体成分复杂，包括黄酮类化合物、银杏内酯和白果内酯等，据报道有抑制血小板活化因子、扩张血管、抗氧化、调血脂等作用，对于心血管疾病、肾病综合征、糖尿病、血管性痴呆等具有很好疗效。 对小鼠离体肠管具有解痉挛作用，也可调节或对抗由内毒素引起的肠动力紊乱。目前Egb制剂已被广泛应用于临床。本实验旨在通过Egb灌流离体小肠标本，观察记录不同浓度Egb对小鼠离体肠道平滑肌的影响，探讨银杏黄酮对肠道平滑肌的作用机制。 【实验原理】 胃肠道的运动受到自主神经系统和分布于胃肠道管壁内神经丛的支配，离体小肠平滑肌尽管失去了外来神经的支配，但壁内神经丛仍然存在，因此在一定程度上离体小肠段能独立地进行胃肠功能的调控。 小肠平滑肌自动节律收缩活动就是由于位于纵行肌与环行肌之间的Cajal间质细胞(Interstitial Cell of Cajal,ICC)产生的慢波节律而起步的。而这种自发活动的产生和传导易受到神经递质、离子环境、胃肠激素等生物活性物质和药物的影响。 【实验材料及方法】 1、实验材料 1.1 动物；小鼠一只（由动物中心提供） 1.2 药物；银杏叶提取物用生理盐水配置成1% 10% 25%三个浓度的溶液 1.3 仪器；常用手术器械 恒温平滑肌槽 张力换能器 bl-420生物信号处理系统 1.4 试剂；台式液 【预期实验结果及讨论】 不同浓度的银杏叶提取物能够不同程度的影响小肠平滑肌自发性收缩 低浓度和中浓度的EGB对离体小肠平滑肌有兴奋作用，随浓度增加，低浓度EGB的兴奋程度成降低趋势，中浓度的EGB的兴奋程度呈升高趋势;高浓度的EGB引发抑制效应，随浓度增加抑制程度降低。 【注意事项】 ⒈加药以前，应先准备好更换用的台式液 ⒉上述药加入的量系参考数值，效果不明显可以补加，但不可以一次性加药过多 ⒊每次试验效果明显后，更换台式液 ⒋浴槽内的温度应保持37度，不能过高或过低 * 银杏叶提取物对小鼠离体小肠平滑肌收缩特性的影响 ICC产生一种起搏电流触发的慢波电流，属于L2型Ca2+电流，因此平滑肌的舒缩依赖于细胞内Ca2+浓度的变化。 平滑肌收缩活动可因胞内Ca2+浓度的降低而减弱，反之增强。肌细胞内Ca2+浓度增加主要通过胞内钙库的释放和胞外摄入两个途径。但Ca2+内流过量则会引发胞内钙离子超负荷而导致细胞结构和功能的损害。 ⒉ 试验方法 2.1 小鼠离体小肠平滑肌标本的制备 取健康小鼠，禁食二十四小时，敲死，沿腹部中线切开，取出小肠，置于盛有室温台式液的烧杯中，清除肠内容物，将其剪成2-3厘米的肠段作为实验标本 2.2 收缩活动的记录方法 将标本的一端固定于L型钩上，置于盛有20ml台式液的平滑肌槽中，另一端连接张力换能器，持续通混合气体（0.95+0.05co2，每秒1-2个气泡），温度（37+0.5），张力负荷2g，,平衡0.5h,待系统稳定后，开始试验。 2.3 银杏叶提取物对小肠平滑肌自主收缩活动的影响 待小肠收缩曲线稳定后，依次加入银杏叶提取物(1% 10% 25%)不同浓度的溶液，加药间隔时间为5分钟，观察银杏叶提取物对 小鼠小肠平滑肌自发收缩活动的影响并记录每次加入银杏叶提取物后平滑肌收缩曲线的变化 *