鸡_干扰素在家蚕中的表达及抗病毒活性测定_李田田.docVIP

?研究报告?  生物技术通报 BIOTECHNOLOGY BULLETIN  2014年第3期  鸡 α 干扰素在家蚕中的表达及抗病毒活性测定  李田田1 杨灵2  易咏竹3  沈桂芳1  张志芳1  李轶女1 （1. 中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081 ；2. 河南省轻工业学校轻工工程系，郑州 450000 ； 3. 中国农业科学院蚕业研究所，镇江 212018）  摘  要 ： 鸡 α 干扰素在防御病毒感染及治疗病毒性疾病中起着重要的作用。旨在利用家蚕杆状病毒表达系统研制有活性的 鸡 α 干扰素。首先对鸡 α 干扰素基因（ChIFN-α）进行了优化与合成，将其克隆到杆状病毒转移载体 pVL1393 中，与 ORF1629 缺 损的亲本病毒 BmBcmid 共转染，纯化重组病毒，再感染家蚕幼虫，收集蚕血淋巴以检测 α 干扰素基因的表达。Western blot 分析结 果显示，成功表达出分子量约为 19 kD 的鸡 α 干扰素。采用细胞病变抑制法在 Vero-VSV*GFP 系统中测定表达产物的抗病毒活性。 所的表达的鸡 α 干扰素具有明显的抗病毒活性，活性不低于 3.2×105 U/mL。利用杆状病毒载体系统成功地表达了具有抗病毒活性 的鸡 α 干扰素的成熟蛋白，为开发廉价高效的鸡干扰素生物制剂奠定了物质基础。 关键词 ： 鸡 α 干扰