高产γ-氨基丁酸的乳酸菌的筛选.pdfVIP

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摘要 本论文首先确定了GABA的测定方法,即用纸层析法定性分析GABA, 纸层析-比色法定量分析GABA,并将测定结果与氨基酸自动分析仪的测定结 果作比较得知,本研究确定的GABA测定方法可靠,准确度高,可用作常规 依据。确定了纸层析分析方法中展层系统和显色系统的组成,展层剂组分中 此时纸层析结果显示谷氨酸与y.氨基丁酸Rf值之差最大,即分离效果最好; 0 对显色时间及温度进行探讨,发现当温度为85℃,显色时间为1rain时, 实验效果最明显?并对样品重复性试验、加标回收率等进行了分析,试验结 果显示纸层析-比色法定量GABA的试验方案重复性较好,相对标准偏差仅为 O.96%,加标回收试验的平均回收率为97.2%,说明此法测定几乎不受基体的 干扰,方法具有较高的可靠性,对后续研究工作奠定了坚实的基础。 以山东轻工业学院食品与生物工程学院保藏菌种植物乳杆菌1.11、乳酸 S圩;购于中科院微生物菌种保藏中心的乳酸链球菌1.1690、发酵乳杆菌 的细菌w1、W2、w3等菌株为出发菌种,采用透明圈平板法筛选、高酸高渗 法筛选以及三角瓶发酵复筛相结合的办法,提高了获得高产菌株的机率,从 而最终获得一株十氨基丁酸高产菌株乳酸链球菌乳酸亚种1.0018。 通过研究碳源、氮源、碳氮源比例、发酵温度、发酵初始pH、接种量等 掌握了比较优化的发酵条件。根据实验结果我们得到优化的培养基组成为: 葡萄糖1.5%、 1.5%、 酵母膏1.0%、蛋白胨1.5%、乙酸钠0.2%、Glu MgS04‘7H2020mg/kg、№S04·4H20lmg/kg、NaCl 筛选培养基(o.68m∥mL)的4倍。 关键词 Y一氨基丁酸;纸层析;乳酸链球菌乳酸亚种;筛选 ABSTRACT The firstdeterminedthemethodofdetectionfor is GABA,which study using to chromato— paperchromatographyqualitativelyanalyseGABA,andusingpaper and to withthe graphycolorimetryquantitativelyanalyseGABA,thencompared resultofAutomaticaminoacid foundthatthemethodof detecting analyser,we for in detectionGABAdeterminedthis is Canbe studyrealiable,highlyeXact.They usedto detectthecontentofGABAinfoodandfermentation regularly sample. out WemadetherelationcurveofGABAcontentand value.whichiSalSO 0D520 calledstandardcarveofGABAand

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