PPARγ激动剂对外周血内皮祖细胞数量和功能影响.pdf

PPAR丫激动剂对外周血内度祖细胞数量和功能的影响 PPAR Y激动剂对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响 硕士研究生：陈军初 导 师：刘世明教授 摘要 背景： 研究表明，内皮祖细胞(endocllelialprogetlitorcells，EPcs)存在于成人机体的 骨髓和外周血中，并参与缺血组织的新生血管形成。外周血EPcs移植后心肌梗死区 域新生血管形成增多，利于挽救梗死区存活心肌，改善心室功能，对于改善心肌梗 死的预后有诸多方面的益处。但外周血EPcs数量有限，限制了其临床应用，因此有 必要对EPCs进行体外扩增。 PPAR Y激动剂能改善内皮功能，对心血管发挥有益作用，这些益处远超出其胰 岛素增敏作用，因已有研究表明EPCs与内皮功能密切相关，故我们猜测其中的可能 机制之一就是通过增加EPCs的数量并改善其功能进而对心血管发挥有益作用。 本研究利用PPAR 观察赛格列酮对体外培养的外周血EPCs数量和粘附、迁移与增殖功能的影响，构建 外周血EPcs体外扩增的方法，并探讨PPARY激动剂对心血管发挥有益作用的可能 机制之一。 方法： (1)采用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞。将其接稀在包被有纤维连接 蛋白的培养板用条件培养液培养7天，收集贴壁细胞，加入不同浓度的赛格列酮(分 别培养6、12、24、48小时以观察时效关系。 阳性细胞为正在分化的EPcs。 (3)利用细胞黏附能力铡定评价外周血EPCs的黏附能力。 (4)利用改良Boyden小室测定外周血EPCs的迁移能力。 (5)利用MTT比色试验评价外周血EPCs的增殖能力。 PPARv激动剂对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响 结果： (1)EPcs的鉴定：分离获得的外周血单个细胞培养7天后呈梭形的内皮样细 ±6．2)％的贴壁细胞呈双染色阳性。 umol／l、O．1址mol／l、1．Oumol／l、10umol／l赛格列酮组的EPCs的数量分别为41±4、 50±5、99±9、113±6、77±10，0．01umol／l组与对照组比较无统计学意义(，0．05)， O．1umol／l组开始有统计学意义(P(O．05)，在一定浓度范围内随浓度增加而增加， 1．0umol／l达最大效应，当浓度过高时EPCs的数量有所下降，但仍高于对照组。1．O ±4、92±7、113±6、76±7，与0小时比较，6小时组无统计学意义(p加．05) PEARY激动剂对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响 时后略有下降，但仍强于对照组。 (5)不同浓度的赛格列酮干预EPcs24小时后增强EPcs的增殖能力，对照组、 o．Olumol／I、0．1 umol，l组与对 为0．47±O．07、0．57±O．05、0．73±O．05、O．86±0．07、0．72±0．05，O．0l umol，l组开始有统计学意义(Po．05)，在一 照组比较无统计学意义(P0．05)，O．1 mol／l达最大效应，当浓度过高时 定浓度范围内增殖能力随浓度增加而增强，1．Ou EPcs的迁移能力有所下降，但仍强于对照组。1．Opmol／l赛格列酮干预EPcso、6、 始有统计学意义(P0．05)，24小时达高峰，48小时后略有下降，但仍强于对照组。 结论：PPARy激动剂赛格列酮能增加外周血内皮祖细胞的数量，并改善其粘附、迁 移与增殖功能。 关键词：内皮祖细胞；干细胞；过氧化物体增殖物激活受体y；噻唑烷二酮；冠心 病 !!坚!翌垫型翌竺旦墨堕星望塑坚塑墨塑边些塑墅堕 Resuns：Incubationofisolatedhuman mononuclearcells耐tll dosearldtime