富亮氨酸胶质瘤失活基因（LGL1）与脑胶质瘤发生发展相关性研究.pdfVIP

摘要 摘要 研究背景 染色体10q24或loq26在超过80％的胶质母细胞瘤中发生杂合性缺失。 chemovalll等人采用定位克隆技术分离出一种新的基因，LGll(富亮氨酸胶质瘤 失活基因1，这种基因在缺乏任何正常10号染色体的T98胶质瘤细胞株中由于 检测到L611基因的重排。这些重排导致胶质瘤细胞中【G11表达的完全缺失。 LGll基因编码分子量为60kD的蛋白而且包含了带有保守序列的3．5个富亮氨 酸重复序列(LRR)。在utR区内，I_G11与许多跨膜和细胞外蛋白高度同源，这 些蛋白的功能是作为受体和黏附蛋白。IGll主要在神经组织尤其是脑组织中表 达；其表达在低恶性脑肿瘤中减少，而在恶性胶质瘤中明显减少甚至缺乏。L611 定位于染色体10q24区，在恶性脑肿瘤中发生重排或失活提示它是与神经胶质 瘤进程相关的候选肿瘤抑制基因。 目的 检测脑胶质瘤组织【Gll基因mRNA的表达，探明其与脑胶质瘤的关系。 对脑胶质瘤组织LGll基因编码区的突变情况进行检测，以发现靶DNA片段中 未知位置的碱基突变，探讨基因突变在胶质瘤发生、恶性进展过程中导致LGn 基因表达降低所起的作用。 材料与方法 1．收集天津市第一中心医院、天津市环湖医院手术切除的27例脑胶质瘤、 2例脑膜瘤、2例瘤旁及2例正常脑组织标本；提取组织标本RNA逆转录为 cDNA： 2．根据LGll基因外显子设计特异性引物。采用RT．PcR方法扩增6个外 显子，半定量方法检测LGllmRNA表达水平。提取基因组DNA，扩增全部外 显子，采用sscP银染分析产物，SscP银染分析发现异常泳动条带进行DNA 测序。 结果 ‘ 摘要 1、脑胶质瘤组的L_G11mRNA表达水平低于正常脑组织和脑膜瘤。 2、脑胶质瘤中，wHOⅣ级的脑胶质瘤LGImRNA表达低于wHOII级 和ⅡI级的脑胶质瘤。 3、琼脂糖凝胶电泳未检测到第9号胶质瘤标本第1a外显子处扩增产物以 及第16号和17号胶质瘤标本第8c外显子处扩增产物。 4、未在18例胶质瘤标本中检测到电泳条带异常。 结论 1．胶质瘤中LGllmRNA表达水平低于正常组织或脑膜瘤组织，提示 LGll与胶质瘤的发生关系密切，是胶质瘤中发生失活的靶基因。 2．本实验未在18例胶质瘤标本中检测到【G11基因的突变。基因突变可 能不是LGn在胶质瘤恶性进展过程中失活的主要原因，在脑肿瘤发生中LGll 基因的未知功能和失活的准确机制尚需进一步研究。 关键词 富亮氨酸胶质瘤失活基因1 胶质瘤RT-PcR基因突变 PCR．SSCP ‘ Ⅱ abshact AbStraCt Bacl‘g珊und ilI L0ssof for isseenover hctemzygosity10q23—26 80％of舀iobl髂toma． to a BChe咖vall】h勰useda isolate Olga positionald伽ingstrategy novel擎ne， Glioma is rcsunofthe LGll(kudne珂chg％e I彻diVated)，whichreaⅡ柚ged鹪a