固定化酶法制备葡甘露低聚糖工艺研究.pdf

固定化酶法制备葡甘露低聚糖的工艺研究 摘要 甘露低聚糖作为功能性低聚糖除了具有促进双歧杆菌的生长繁殖以外， 近几年的研究表明：它是唯一一种能与肠道中外源病菌结合的功能性低聚 糖。它将有望成为抗生素的“替代品”。本论文通过对B．甘露聚糖酶的制备， 酶的性质，B．甘露聚糖酶的固定化，固定化酶性质以及固定化酶制备葡甘 露低聚糖的工艺进行研究。 用硫酸铵盐析法纯化B．甘露聚糖酶，结果表明去除杂蛋白的最佳硫酸 铵饱和度为40％，酶比活力上升了22．5％。B．甘露聚糖酶的最适反应pH值 定性；在小于60℃下酶具有良好的热稳定性；在最适反应温度60。C下保温 4h之后，剩余酶活力为85％。 酶活力回收率为52．1％。 固定化B．甘露聚糖酶的最适反应温度和最适反应pH值分别为75℃和 存方式：将制备好的固定化酶浸泡在缓冲溶液中4C保藏；载体与酶蛋白结 剩余酶活力为64．5％；贮存性能：固定化酶在4。C下保存10天后，剩余酶活 力为79．4％。 用薄层色谱洗脱法检测葡甘露低聚糖的含量，结果表明采用上行薄层色 照低聚糖的Rf值将硅胶板上相应的硅胶刮下，用纯净水洗脱定容至25mL。 取洗脱液2mL用苯酚．硫酸法检测计算葡甘露低聚糖的含量。 由单因素实验得出固定化甘露聚糖酶制备葡甘露低聚糖的最适反应时 间为15h；最适魔芋胶浓度为2．0％；最适加酶量为13300U。由均匀实验得 露低聚糖的最佳工艺条件为：魔芋胶浓度为1．5％、加酶量为13300U、反应 露低聚糖得率为：30．8％。 关键词：B．甘露聚糖酶、固定化、葡甘露低聚糖、魔芋胶 II on StudyProducing by Immobilized Enzyme ABSTRACT asoneofthefunctional not Maunan-oligosaccharidesoligosaccharidesonly the ofbifid alsoisthe that promotegrowth bacterium，but only can exoticbacteriumfrom downintoourbodv to protect settling according recent itis to bethe of investigation．Andhopeful replacement thesissomemainconclusionsresearchesof of13 got bydoing production ofthefree -mannase，characters enzyme，immobilization charactersof theimmobilizedandthe ofMOS the enzyme productionusing immobilized enzyme． concent