川芎嗪拮抗庆大霉素耳蜗毒性作用实验研究.pdf

中 文 摘 要 川苟嗓拮抗庆大霉素耳蜗毒性作用 的实验研究 摘 要 目的:氨基糖贰类抗生素是化学结构中含有氨基糖分 子的一类广谱抗生素。其耳蜗毒性作用与前庭毒性作用已 被人们所熟悉，但其耳毒性的作用机理尚不太清楚。近年 来，对氨基糖试类抗生素的毒理机制研究不断深入。研究 表明:其在耳蜗毛细胞可以诱导产生过量的氧自由基和一 氧化氮，自由基和一氧化氮分布于内、外毛细胞的胞浆， 血管纹的基底及血管内皮中，在病理条件下，通过若干机 制造成组织与细胞的损伤，从而影响细胞的代谢和功能。 川芍嗦是一种临床上常用的扩张血管及改善微循环的中 药，可以通过对超氧阴离子的清除来阻止细胞脂质过氧化。 本实验研究通过建立庆大霉素内耳中毒的动物模型，运用 听性脑千反应测定，光镜、扫描电镜及透射电镜，血清学 检测等手段，研究川芍嚓对庆大毒素耳蜗毒性所起的拮抗 作用，同时探讨其可能的作用机理以及与肾毒性的关系。 材料与方法:将健康白色红目豚鼠随机分成三组:实 验组、拮抗组及对照组。实验组腹腔注射庆大霉素 180mg·kg-I，每天1次，连续14天;拮抗组腹腔注射川 芍嗦120mg·kg”和庆大霉素180mgkg，每天1次， 连续10天;对照组腹腔注射等量生理盐水，每天1次，连 续10天。每组豚鼠均于用药前及停药后测试听性脑干反应 闽值及 1波潜伏期，以观察其听功能变化。并于实验结束 后断头取耳蜗，一部分标本用4%多聚甲醛固定后脱钙，石 中 文 摘 要 蜡包埋，切片行光镜观察。一部分标本用2.5%戊二醛固定， 暴露耳蜗基底膜，饿酸处理，干燥、喷镀，用于扫描电镜 观察。其余一部分标本用4%戊二醛固定，脱钙，取耳蜗基 底膜，饿酸处理，脱水、包埋，切片后行透射电镜观察。 每组豚鼠于第10天注射庆大霉素检测ABR后，取血，测定 其血清尿素氮和肌普。 结果:ABR听闭测定:用药前后对比，对照组 ABR 听闲值及I波潜伏期无明显变化。实验组应用庆大霉素10 天后ABR闽值显著上升，I波潜伏期明显延长。拮抗组 ABR闽值及I波潜伏期也有所上升，但较实验组明显降低 (p0.01)。对照组与拮抗组之间差异无显著性 (P0.05). 光镜下观察:对照组耳蜗螺旋器与螺旋神经节细胞结 构正常，耳蜗螺旋器内的内、外毛细胞排列正常，无肿胀 及变形。实验组耳蜗螺旋器内的内、外毛细胞破坏明显， 细胞明显变性，外毛细胞膜破裂，核移位及消失。拮抗组 的耳蜗螺旋器结构正常，内、外毛细胞形态基本接近正常。 扫描电镜下观察:对照组耳蜗螺旋器内的内、外毛细 胞纤毛排列整齐。实验组的大部分内、外毛细胞纤毛排列 散乱、倒伏，甚至缺失。拮抗组的内、外毛细胞排列整齐 有序。 透射电镜观察:对照组耳蜗螺旋器内各种细胞的结构 正常。实验组的毛细胞线粒体肿胀明显，靖减少或消失， 外膜破坏及局部膨出，表皮板部分溶解，或不均匀增厚， 静纤毛排列紊乱，神经纤维髓鞘结构水肿，部分变性溶解。 拮抗组内、外毛细胞结构基本正常。神经纤维髓鞘结构正 常。 中 文 摘 要 血清检测:实验组与拮抗组血清尿素氮和肌昔值差异 存在显著性 (p0.01)。 结论 :本实验结果表明，通过对豚鼠给药前后ABR 阂值及I波潜伏期的实验观察，庆大霉素对豚鼠的听力有 明显损害，而应用川芍嗓拮抗后可以使听力损害明显减轻口 而应用光镜和电镜进行形态学观察，可以发现庆大霉素对 耳蜗螺旋器造成了明显损害，如螺旋器内毛细胞倒伏、缺 失，线粒体明显肿胀，神经纤维髓鞘水肿、溶解等。而应 用川芍嚓拮抗后，耳蜗毛细胞损伤明显减轻，因此证实川 芍啧对庆大霉素所致豚鼠耳蜗毒性作用有一定拮抗作用。 同时对豚鼠血清尿素氮和肌昔的测定，也证实在川夸嗦拮 抗庆大霉素耳毒性的同时，也对其肾毒性有一定拮抗作用。 由本实验可以推测庆大霉毒所致耳蜗毒性作用机制及川芍 臻拮抗庆大霉素耳蜗毒性作用机制。庆大霉素在耳蜗毛细 胞中积累的部位主要是线粒体，可刺激产生过量的氧自由 基和一氧化氮。它们的细胞毒性和神经毒性可造成耳蜗的 严重损伤，使毛细胞的细胞膜、线粒体及溶酶体受到损害， 破坏毛细胞的功能