磷酸二酯酶V抑制剂对肺高压大鼠肺动脉内皮舒张功能及肺血管重塑作用实验研究.pdf

复旦大学博士论文 缩略词表 复旦大学博士论文 中文摘要 磷酸二酯酶V抑制剂对肺动脉高压大鼠肺动脉内皮舒 张功能及肺血管重塑作用的实验研究 中文摘要 目的：建立肺动脉高压大鼠的模型，并且以此为基础，从肺动脉高压大鼠的肺 血管内皮舒张功能改变和肺血管重塑两个过程观察磷酸二酯酶V抑制剂(西地 那非sildenafil)对肺动脉高压大鼠的作用，并探讨其可能的机制。 方法：1)经颈总动脉和颈静脉端一端吻合建立SD大鼠左向右动静脉分流肺循 环血流增加的肺动脉高压模型；另外，建立经腹腔注射野百合碱60rag．kg’1造成 大鼠肺高压的模型。2)24只SD大鼠随机分为3组(每组8只)：对照组(c组) 即伪手术组；手术6周组(06组)和手术10周组(0lo组)，如上方法制作肺循 环血流增加肺高压模型，术后06组饲养6周，Olo组饲养10周。至观察终点， 测各组颈总动脉压(mSAP)、肺动脉平均压(mPAP)，右心房血气，右心室肥 变化。3)另取SD大鼠40只做磷酸二酯酶V抑制剂作用的研究；随机分为伪 手术组(C组)和手术组(O组)，C组伪手术后做为对照，0组制作颈部动静 脉分流动物模型；两组大鼠同条件下饲养10周后，再随机分为四个亚组(每组 和右心室肥厚指数；随后c+S组和O+S组经颈静脉注入盐酸西地那非 在体实验结束后，取各组肺动脉段，测游离肺动脉环对乙酰胆碱浓度(Ach)反 应曲线和对硝酸甘油lgM舒张功能，C+S组和O+S组测Ach浓度反应曲线时预 加sildenafil。观察肺循环血流增加的肺动脉高压模型中肺动脉血管舒张功能改变 照组)、P组(安慰剂组)和S1组和S2组。C组仅腹腔注射生理盐水一次；P 腹腔注射sildenafil 25rag．kg。1d～，s2组腹腔注射sildenafil50mg．kg。1d～，P组腹腔 注射生理盐水lml．d。(等体积与sildenafil 50mg．kg。)；各组大鼠同条件饲养6 周到观察终点，测mPAP和右心室肥厚指数(RV／LⅣ+s)，麻醉处死动物取肺组 织做病理切片，观察肺小血管HE染色的病理改变，计算肺小血管管壁与管腔比 值，同时将切片做u—actin免疫荧光染色，判断肺小血管肌化程度；并检测各组 蛋白和MKPl蛋白的表达。 2 复旦大学博士论文 中文摘要 结果：1)颈部动一静脉分流后复制了肺循环血流增加的肺高压模型，表现为经胸 心脏彩超显示肺动脉血流峰值前移；且mPAP升高和右心室肥厚指数升高；腹 高；病理表现为直径2009m的肺小动脉管壁与管腔比明显增加；同时肺动脉 Ⅱ一actin免疫荧光染色增强。2)利用颈部左向右分流肺循环血流模型的06组和 量在各组无明显差异。3)利用颈部左向右分流肺循环血流模型O+P组与O+S 下降；0组两个亚组与C组两亚组间的游离肺动脉环对Ach和硝酸甘油舒张最 大舒张百分比减少；但O+S组和O+P组相比，对Ach和硝酸甘油舒张最大舒张 组无明显差异，各浓度下O+S组舒张百分比较O+P组增加，O+S组舒张功能改 善，O+P组舒张百分比最小，与各组比都有差异(PO．01)。4)腹腔注射野百合 碱的P组、S1组和S2组均发展为肺动脉高压，但Sl组和S2组程度比P组轻， 蛋白P组升高，与P组比s1组和S2组有降低，MKPl蛋白表达P组升高，在s1 组和s2组则继续增加。 结论：1)大鼠经颈部左向右分流肺循环血流模型成功得模拟了临床中左向右分 流肺高压病例的血流动力学改变；腹腔注射野百合碱成功模拟肺高压模型，并模 拟了肺血管重塑的病理改变。2)肺循环血流增加后内源性内皮素一1(ET一1) mRNA 和一氧化氮(NO)发生改变，这是造成肺高压的原因之一，preproET-1 表达增加与肺动脉血压增高和右心肥厚并存。3)磷酸二酯酶V(PDE5)抑制剂 Sildenafil可降低动