保定市2001-2002年流感流行期病原学特性研究.pdf

中文摘要 保定市2001-2002年 流感流行期病原学特性研究 摘 要 目的人流行性感冒简称流感，是由甲(A)、乙 (B), 丙(C)三型流感病毒分别引起的急性呼吸道传染病，在我 国北方常引起暴发和流行，属国际监测疾病之一。其难控 制的主要原因是病毒抗原尤其是血凝素和神经氨酸酶易发 生变异，使人群通过感染或疫苗得到的免疫对新流行株失 去作用。二十世纪引起三次世界大流行的病毒株均首发于 中国。为研究流感病毒地方株的型别变迁规律，及时抓住 有意义变异株，指导今后流感的监测、诊断及试剂和疫苗 研制，搞好流感疫情预报和及时采取防患措施来减少其所 造成的损失，本研究对2001-2002年流行期保定市流感病 原学特性进行了研究，并对人群感染情况进行了调查口 方法 在保定市采集疑似流感患者的咽拭标本，接种传 代狗肾细胞 (MDCK)分离流感病毒，用鸡和豚鼠的红细胞 做血凝试验测定病毒的滴度，通过血凝抑制 (H工)、神经氨 酸酶抑制试验 (NI)和反转录多聚酶链反应 (RT-PCR)进 行型别和亚型鉴定。比较新分离毒株与国际国内代表毒株 抗原差异。合成了一对针对甲3亚型流感病毒血凝素HA,基 因的引物，对甲。亚型新分离株的血凝素HA,基因做了进一 步分型鉴定。在流行期后采集健康人群血清，测定对新分 离毒株的血凝抑制抗体水平。 结果 1.2001年11月一2002年3月流感流行期间共采 中文摘要 集疑似流感患者咽拭标本89份，接种MDCK细胞48-96 小时后，16份出现细胞病变(CPE)，血凝效价在1:8-1:160 经血凝抑制试验和神经氨酸酶抑制试验鉴定均为流感病 毒，病毒检出率为17.98%。其中12株为甲。亚型 (H,:N1) 0”相毒株，3株为甲亚【型 ((H,N,),1株为乙型毒株， 甲:亚型为优势毒株。 2，用国际和国内代表株的免疫血清经血凝抑制试 验进行抗原分析，结果显示甲。亚型代表株 A/福建 /151/2000(H,N.),A/CNIC/123/2001(HA,)和 A/武汉 /359/95(HA)免疫血清对相应抗原的HI效价分别为1: 1280,1:640和1:640，对 12株新分离株的HI效价GMT 分别为1:640,1:341.12和1:214.24，表明新分离株的 抗原比较接近A/CN工C/123/2001(HA)毒株，而与过去 代表株A/武汉/359/95(H,Nr)差别较大。甲，亚型代表 株A/CNIC/143/2001(H,N,)和A/上海/7/99(H,N,)的免 疫血清对相应抗原的H工效价分别为1:960和1:640，对 3株新分离株的血凝抑制效价GMT分别为 1:500.58和 1:403.17之间。表明3个新分离到的甲，亚型毒株的抗 原性与当前国家代表株的基本类似。用当前流行的两系 乙型毒株yamagata系的B/上海/20/2001和victoria系 的B/浙江/2/2001免疫血清，对在保定分离到的1株乙 型毒株进行了HI测定，结果，该毒株能被 B/上海 /20/2001的免疫血清所抑制，证实其属yamagata系毒株。 3.新分离到的甲a亚型毒株能凝集豚鼠的红细胞， 几乎不凝集鸡的红细胞，为 “O”相毒株，提示今后应同 时应用鸡和豚鼠的红细胞进行血凝和血抑试验，需在4 中文摘贺 ℃条件下进行，以防漏检。(f0”相毒株的重现也提示鸡 胚已不是流感病毒最敏感的宿主，而MDCK细胞是当前 人群中流行的流感病毒敏感性较高的细胞。 4.自1977年以来，在人群中流行着甲。和甲:两个 亚型的甲型流感病毒 以及两系乙型流感病毒，即 BNictoria/2/87类毒株系和B/YamagataJ16/88类毒株系。 数种不同型及亚型流感病毒同时在人群种流行，增加了 流感病毒诊断及抗原鉴定的难度。本研究用RT-PCR对1 株代表毒株和 10株在保定市新分离到的甲:亚型流感病 毒HA，基因进行了分型，结果均扩增出了380bp的设计产 物，进一步证实其为甲3亚型病毒，与HI试验结果相一 致，故可作为难鉴定病毒如 “