溶血磷脂酸受体在卵巢上皮性肿瘤中表达及生物学意义.pdfVIP

中文摘要 Y 溶血磷脂酸受体在卵巢上皮性肿瘤中的表达 及生物学意义 摘 要 acid 目的：溶血磷脂酸(LysophosphatidicLPA)，是最 简单甘油磷脂，基本结构包括磷酸集团、甘油骨架和长链脂 肪酸三部分。作为细胞间的多功能磷脂信使，具有广泛的生 物学活性：平滑肌的收缩，血小板的聚集，神经细胞的回缩 等；在肿瘤方面可促进肿瘤细胞的增殖、侵袭及化学趋化性 等。LPA是Mills等在卵巢癌患者的腹水中发现的一种新的生 长因子，它可以使细胞内游离钙离子的水平增加，刺激卵巢 癌细胞生长。1995年，Xu等从卵巢癌患者的腹水中分离纯化 提取出LPA，又于1998年在卵巢癌患者的腹水和血浆中检测 水平，发现卵巢癌患者的渗漏液中LPA的水平与其他恶性肿 瘤相比要明显升高。这些都提示了LPA对卵巢癌的发生发展 有着重要的作用。在卵巢癌领域随着对LPA研究的深入，发 现LPA是通过与特异性受体结合而发挥作用的，该组受体为 GPCR)，被命名为 G蛋白偶联受体(G—proteincoupledreceptor DifferentiationGene 内皮分化基因(Endothelid Edg)或溶血磷 脂(Lysophosph01砸dLP)受体亚族，其中与LPA亲和力较强的 的G蛋白活化，并进一步激活G蛋白介导的信号通路，最终导 致基因表达或蛋白质改变，产生生物学效应。分析LPA受体的 表达，可以理解LPA与卵巢癌发生发展的关系，进而为卵巢 中文摘要 两种方法，检测LPAl、LPA2及LPA3三种受体在卵巢上皮癌、 卵巢良性上皮肿瘤及卵巢正常上皮中的表达，并分析LPA与 卵巢癌的恶性生物学行为之间的关系。 方法：本课题实验所选用的研究标本取自2003年6月至 2004年12月河北医科大学第四医院妇科的手术切除标本，均 经术后病理确诊的卵巢癌42例(浆液性囊腺癌18例，宫内膜 样癌15例，粘液性囊腺癌9例)，卵巢良性上皮性肿瘤8例(浆 液性囊腺瘤3例，粘液性囊腺瘤5例)及正常卵巢上皮8例(均 取自子宫肌瘤患者，取卵巢表面约2—3mm厚的皮质)。按 在病理分级上Gl级6例，G2级25例，G3级11例。所有组织标 本于离体后2小时内放入液氮中骤冻，而后保存于一80℃冰 LPA，和LPA，的mRNA的转录水平。从组织标本中提取总 RNA，并通过电泳和紫外分光光度仪鉴定RNA的完整性及纯 度。待扩增引物据NCBI 7 断长度为342bp，5 (U)，5 7(L)；LPA2扩增 7 片断长度为299bp，5 (U)，5 7(L)；LPA3扩 7 57．ACACCCATGAAGCTAATGAAG一3 增长度为379bp， B—actin (U)，5 7(L)； 扩增长度为838bp，5 TGAGCTGCG一35 7(U)， ATCTGC．3 7(L)。温度循环参数： 2