幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮细胞E2F-1表达与其增殖调亡相关性研究.pdf

中文摘要 幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮细胞E2F-1表达 与其增殖凋亡的相关性研究 摘 要 临床和流行病学资料证实，Hpylori感染是慢性胃炎和 消化性溃疡的主要病因，并与胃癌的发生密切相关。目前认 为Hpylori感染引起的胃黏膜上皮细胞生长动力学改变在其 致病机制中起重要作用，对活检标本研究显示：Hpylori感 染引起胃上皮细胞增殖和凋亡增加，根除Hpylori后增殖和 凋亡水平降至正常，Hpylori及其分泌物均对胃上皮细胞生 长产生影响。 本研究拟用增殖细胞核抗原(PCNA)评估细胞的增殖状 况。PCNA又称周期蛋白，是DNA多聚酶6的一种辅助因 子，静止期细胞含量很少，G-晚期开始增多，s期达到高峰， G：期、M期的含量较低，是评价细胞增殖状态的主要指标。 细胞凋亡是影响细胞生长动力学的重要因素，对维持细 胞群体适当的数目及正常功能有重要意义，它是一种不同于 坏死的主动死亡形式。在核固缩、碎裂的同时，凋亡细胞裂 解为多个有质膜包被的‘‘，j、体”，可被臣噬细胞吞噬，主要特 征是染色质的有控降解，DNA双链在核小体连接部断裂，形 成180—200bp的亚单位片段或其数倍的片段。目前常用的检 测方法有：用光镜、电镜或荧光显微镜观察其形态学特征识 别凋亡细胞；末端转移酶介导的dUrP切口末端标记法 (TUNEL)特异识别DNA片段的3’一羟基末端；凝胶电泳检 测核小体DNA片段；流式细胞仪或激光扫描细胞形态分析 中文摘要 仪对不同细胞周期的凋亡细胞进行定性和定量研究。对活检 标本常用一般的形态学检测进行预实验，然后用TUNEL进 一步证实。本实验采用HE染色后在光镜下观察，再用 TUNEL检测。 目前对Hpylori感染引起细胞增殖和凋亡改变的机制仍 不清楚，E2F．1在维持组织细胞的增殖和凋亡平衡中起关键 作用，能通过诱导多种在G，期起关键作用的基因表达，启 动DNA合成，控制细胞周期G1／S期的转换。E2F．1过表达， 可引起Gl／S期的过渡失调，加速细胞通过Gl期，使细胞无 限增殖，参与肿瘤的发生。在胃癌、结肠癌、多发性骨髓瘤 等恶性细胞中均检测到E2F一1基因的扩增和蛋白表达上调， 但亦有报道E2F．1过表达可以通过P53依赖途径及非P53依 赖途径诱导细胞凋亡，所以明确Hpy／or／感染的胃黏膜上皮 细胞E2F．1表达及其与胃上皮细胞增殖和凋亡的关系，对研 究H pylori致病机制有重要作用。 目前多数学者认为宿主的胃酸分泌状况在一定程度上 决定了Hpylori感染的临床结局，胃酸分泌增高的月：pylori 感染患者，以胃窦部炎症为主，胃体泌酸黏膜的萎缩较轻， ulcer,Dm；而胃酸分泌无变 易发生十二指肠溃疡(duodenal 化或降低的月：pylori感染患者，炎症多累及胃体，往往伴有 一定程度的黏膜萎缩，易发展成为萎缩性胃炎，甚至胃癌。 国内外最近研究报道有一定比例的DU患者伴有胃癌，与上 述观点相悖，本研究在排除胃溃疡、萎缩性胃炎、肠化生和 不典型增等癌前病变的基础上，为了全面的反映Hpylori感 染对胃黏膜上皮细胞的影响及排除患者自身因素的干扰，同 时选取11．pylori感染的慢性浅表性胃炎(chronicsuperficial 中文摘要 gastritis，CSG)和DU患者的胃黏膜进行对比研究，旨在明确 不同胃酸分泌状态是否影响Hpylori感染引起的胃黏膜上皮 细胞增殖与凋亡。 第一部分幽门螺杆菌感染的胃黏膜上皮细胞E2F-1表达 与其增殖凋亡的相关性研究 目的：研究Hpylori感染的胃黏膜上皮细胞E2F．1的 表达及与胃黏膜上皮细胞增殖凋亡的关系，为研究Hpylon 致病机制提供新的线索。 方法：收集快速尿素酶和组织学检测均为Hpylori阳性 的患者46例，包括慢性浅表性胃炎(CsG)患者23例，十二 指肠溃疡(D∽患者23例。H pylori阴性正常对照15例。对 DU患者进行根除H pylo