鹅细小病毒中国分离株HG5%2f82的回顾性研究论文论文.doc

摘  要  小鹅瘟  Gosling Plague  GPa 是由细小病毒科  细小病毒属中的鹅细小病毒  Goose Parvovirus  GPV 引起的一种烈性传染病  主要发生于 1 月龄内雏鹅和雏  番鸭  以急性肠炎及肝  肾  心等实质脏器炎症为特征  该病病程短  传染性强  死亡率高  在欧洲  亚洲等许多国家相继都有发生 给水禽养殖造成了巨大的经济  损失 本实验旨在研究 1982 年一株鹅细小病毒流行株基因的分子生物学特征 并与国 内外分离株相应基因进行分析比较 为进一步研究 1982 年流行株 HG5/82 和国内外 流行株间的基因遗传变化规律 GPV 的基因功能 及病毒分子致病机理提供了一定 的分子基础  1  用鹅胚分离到鹅细小病毒  测定了第五代病毒尿囊液 HG5/82 对 12 日龄鹅 胚的 ELD50 为 10-5.92/0.1ml 雏鹅接种试验表明该病毒对 12 日龄雏鹅的致病性较弱  用套式 PCR 检测雏鹅肛拭子病毒的体外排放情况  发现三个试验组在接种病毒后 1  20 天均可检测到病毒 93.6%  PCR 产物序列与 GPV 参考毒株 B 的相应序列同源性达  2  提取病毒 DNA 根据国外已发表的 GPV 基因序列  设计并合成引物  用  聚合酶链式反应技术扩增得到 GPV 中国分离株 HG5/82 的非结构基因与结构基因  片段大小分别约为 1.9kb  2.2kb 的片段  将该片段分别进行克隆及序列测定  并与  GPV 国内外部分已发表的毒株及番鸭细小病毒的对应序列比较 结果表明 我国地 方分离株与国内外鹅细小病毒相比 NS 基因和 VP 基因均表现出较高的同源性 并  且具有共同的分子特征  结构基因 VP3 间变异较小  这是目前 GPV 只有一个血清  型的分子基础 为基因工程苗的研制提供了可行性 HG5/82 与番鸭细小病毒 FM 株  相应序列比较发现  与细小病毒其它成员相比两者具有较近的亲源关系  但这种同  源性明显低于鹅细小病毒之间的同源性  关键词  鹅细小病毒  分离  鉴定  生物学特性  NS 基因  VP 基因  分子特征 Retrospective study of a goose parvovirus stain HG5/82 which was isolated in China Li Gui-xia (preventative veterinary) Surpervised by Kong Xian-gang, Ran Duo-liang and Liu Sheng-wang professors Abstract Goose parvovirus (GPV) infection is a highly fatal disease of goslings and Muscovy ducklings under 1 month old .The causative agent of the disease has been classified as a member of the Parvovirus genus of the Parvoviridae, goose parvovirus. The disease is characterized by acute enteritis and high mortality. The outbreak of GPV has been reported in many countries including Europe and China, which result heavy economic losses. This study is to research the molecular characteristics of the virus that popular in 1982.Mean- while,the NS and VP gene were compared with other strains. This study offers a good base for further investigations that including genome function, mutation regulation of genome and pathogeny of the virus et al. 1. A field strain of GPV was isolated successfully from goose embryos in this study