COX-2在食管癌细胞系中功能研究.pdf

缩略语表 cDNA acid deoxyribonucleic complementary COX．1 cyclooxygenase-1 COX一2 cyclooxygenase一2 DEPC diethylpyrocarbonate DMSo sulfoxide dimethyl dNTP deoxyribonuleoside triphosphate ethidium EB bromide ESCC cellcarcinoma esophagealsquamous ELISA linkedimmunosorbent enzyme assay FCM flow cytometry HEPES sulfonic 4一f2一Hydroxyethyl)·1一piperazineethane acid virus MMIj、， murineleukemia moloney MOPS acid 3-(N—morpholino)propanesulfonic mRNA RNA messenger M’兀1 methabenzthiazuron nonsteroidal NSAIDS anti-inflammatorydrugs PBS bufferedsaline phosphate NS一398 fonamide PCR chainreaction polymerase PGE， E2 Prostaglandin RNAi RNAjnterference SC+560 luoromethyl pyrazole RNA siRNAsmallinterference TBS trisbuffersaline 2 中文摘要 食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一，因其发现较晚、又缺乏有效 的治疗方法，5年生存率小于10％。包括我们在内的多家实验室研究发 现环氧化酶．2(Cox．2)食管癌中表达上调并与肿瘤的预后有关，在肿 瘤的发生发展中起着重要的作用。本研究将对食管鳞癌上调基因 COX．2在食管癌细胞系中的作用及其机制进行初步探讨。 我们针对COX．2基因设计并合成了三个siRNA靶序列，构建了 neo，用脂质体转染的方法以质粒为 siRNA表达质粒pSilencerrM2．1，U6 胞内，通过G418筛选，获得了稳定克隆，经过RT-PCR和免疫细胞化 学鉴定，得了COX．2表达抑制程度达70～90％的稳定克隆，为研究 COX一2在食管癌细胞系中的功能建立了模型。