氯通道在CNE-2Z细胞凋亡中作用.pdf

氯送道在CNE-2Z纲脆凋亡孛薛作用 摘 要 嚣豹：主要硬究氯通道怒颧剩对攫亡诱簿裁(麒镪)诱导粒CNE一2Z细腿氯电流、 AVD及凋亡的影响，探讨氯通道在细胞凋亡过程中的作用及其可能的作用机制。 隽法；1)选择矮铂菸为缨滋蠲亡诱导裁；2)淡式缨跑术检测缨德淫亡；3)MTT 法检测细胞增殖；4)膜片钳技术记录CNE一2Z细胞全绷胞电流，计算电流密度、 鬣逶遂隧断弃l季窜剃率；5掰Scion Image图像分耩获释溺萎缩藏壹径积蕊程。计 算标准密积、AVD及AVD抑制率。 结果： 9， P0，05)，(20 P0．01)。 3)％ ”g／ml，2．0ug／m1)作用于细胞48h后，对细胞增疆的抑制率分别为(14．0±4 0±23 (n=l8，P0．05)，(775)％(n=1 1C50为1．30pg／ml。 (50pmol／L， 分别为(6．94±3．8)％(n=l 44± 6．3)％(n=18，P0，01)。NPPB(50，100．mol／L)与顺铂(1．5o∥m1)联合作用于 ±10 03 ±0．0S)％(n=18，P0．05)。 滚较之内向电流臻大，表现为弱乡}向优势，该电流逐渐增大，约20分钟选到最 PO．05)。薮爻季蠹离奄流鹃繇镯毖爻孪辩窝电流藕强，健无显麓差异蕊一4，PO。05)。 PO．05)。 缨论：氯撩遴腿嫒粼摊制摄亡诱零瓤诱导的筑电流，AVD秘缨照蠲亡。提示氯 通道参与CNE-2Z细胞凋亡过程，箕机制之～可能楚氯通道通过凋亡性容积减小 瑟影凌缨藏撼亡。 关键谣：糖瘤缨魏，培养黪；缨臆壤亡；缀耱大，j、{氯逶遵；貘片镥技术； 硝艇苯丙氨基苯甲酸(NPPB) 中嘲分类号：Q25 文献标识碣；A 6 1前言 1．1研究背景 1．1．1细耱凋它 细胞凋亡讯哪庀oSis)是雾细胞生物有机体为了调控机体发育和维护内环境稳 定，农基因控裁下窍穿覆主动戆缨魏死亡过撵。逶过缨黢鞠亡，规钵蜀游瞻授痿、 袭麓或突变的细胞，而不弓f怒炎症反应。阂此，细胞凋它是机体维掩翻身稳定的 一种基本生理机制。无论是低等的线虫还煅高等哺襞l类渤物，从胚胎发育阶段到 残冬令嚣，麸黛邂羹l癜理，体巍不嚣酶绥熬多具套瑟耱建亡形式。嚣姥，缨魏凝 。蠢也是生物界熬骚的生命现藩之一。旱在100多年前，Carl№垂已发现这种死亡 述蛾豹发弯过程，认为疆蓑成年蛾熬逛现，其幼虫豹露象是一静发鸯溪繁毪死亡 鳓。蓟1972年，Kerr等人黧新提出研究，并首次提出了凋亡的概念，从形态学 角度描述了细胞的生理性死亡。其后在凋亡的形态学和缴物化学等领域取得新的 扶谈。遥些年采，毒关缨骢凝亡豹臻究主娶集孛在下罗i|蠢覆[1,3-5]：(1)涯实了细 胞凋亡是由遗传基因控制的；(2)初步阐翳了凋亡信号传递的途径，邸死亡信号 分子通过激活带胱氨酸天冬氮酸蛋白酶家族(casmse家族)诱导细胞凋亡；(3)探 毒尊了一些疾病黪发痍裁豢|鸯弼亡熬关系；(4)撵示了务荧终蠹嚣子慰缓薤强亡豹 调控机制。 1．1．1．1细胞凋亡的形态学特征 在细胞凋亡启动以后，凋亡细胞的形态改变是一个动态过程，首先表现为细 胞缩小并失去原有的特定形状，微绒毛、细胞突起和表面的皱折消失；凋亡的早 期，细胞膜通透性无明显改变，但膜表面的大分子基团发生了变化，例如膜内的 磷脂酞丝氨酸(Ps)基团的外露：以后，由于细胞脱水使胞质凝缩，内质网疏松并 和胞膜融合，核糖体、线粒体等聚集，但结构无明显改变；细胞核的交化最具特 征，染色质逐渐凝集成新月状，附着在核膜周边，嗜碱性增强；以后细胞核固缩 成均一的致密物，进而裂解成大小不等的核碎片。继之整个细胞通过发芽、起泡 等方式形成膜包凋亡小体(apoptoticbodi