菊花的组织培养88730.pptVIP

* 菊花是菊科菊属多年生草本植物，原产于我国。它花色繁多，品种丰富，具有很强的观赏价值，是目前世界上栽培最广的切花及盆花之一，也是中国十大名花之一。它的繁殖可以用播种法、扦插法，分株法、组织培养法。 菊花的组织培养 1、掌握植物组织培养相关理论知识； 2、学习植物组织培养的操作方法； 3、掌握植物组织培养过程中使用的无菌技术 。 1958年 美国 斯图尔德 它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度。 细胞分化： 在个体发育中，细胞在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程。 1.持久性： 4.不可逆性 3.普遍性 2.遗传物质不变性： 特点： 遗传信息执行情况不同 离体的器官、组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根和芽 植物体 脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 愈伤组织：细胞排列疏松而无规则，是高度液泡化的、呈无定形状态的薄壁细胞。 再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 植物组织培养： 植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 又称：植物离体培养 必要条件： 1.离体 2.一定的营养物质、激素和其他外界条件 植物组织培养原理： 植物细胞的全能性 细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 概念： 原因： 生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 全能性的比较：受精卵 生殖细胞 体细胞 植物细胞 动物细胞 影响植物组织培养的因素： （一）培养基的配置 （二）外植体的选取 （四）消毒 （五）接种 （六）培养 （三）植物激素的影响 （七）移栽和栽培 甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素以及蔗糖等 —— MS培养基P84 （一）培养基的配置 大量元素： 微量元素： 有机物： 植物激素： N、P、K、Ca、Mg、S B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 生长素、细胞分裂素、赤霉素等 1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持培养基的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 制备MS固体培养基 1、配置各种母液 ①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存。 ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液。 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。 将锥形瓶与其他器械放入 灭菌。 2、配置培养基 配置1L MS培养基时，先将称好的 加入 蒸馏水，加热使琼脂融化，然后加入 ，取配置好的大量元素、微量元素、有机物和植物激素的 ，依次加入，加蒸馏水定容至1000ml， ，最后分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml。 琼脂 800ml 蔗糖30g 母液 调节PH 高压蒸汽锅 3、灭菌 注：由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素。 1.不同植物的组织培养难度不同； 2.同一种植物的不同组织培养难度不同； 3.同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果。 讨论：菊花的组织培养，为什么一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝？ 生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 （二）外植体的选取 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 同时使用 先使用细胞分裂素后使用生长素 先使用生长素，后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 （三）植物激素的影响 有利于细胞分裂，但不利分化 细胞既分裂也分化 分化频率高 生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响。（P36） 比值高时 比值低时 比值适中 结果 生长素/细胞