第三章植物组织培养的基本原理2011.3.9.pptVIP

第三章 植物组织培养的基本原理 主 要 内 容 植物细胞全能性和细胞分化 离体条件下植物器官的发生 第一节 植物细胞全能性和细胞分化 一 植物细胞全能性 二、植物细胞分化 植物细胞全能性 细胞学说 1902年，Haberlandt提出了植物细胞的全能性理论：植物的体细胞在适当条件下，具有不断分裂和繁殖，发育成完整植株的能力。 70年代：细胞全能性：每一个细胞具有该植物的全部遗传信息，具有发育成完整植株的能力。 80年代：每一个植物细胞带有该植物的全部遗传信息，在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型的细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整的植株。 一些高度分化的植物细胞如筛管和木质部细胞目前暂时不能表现出细胞全能性。 全能性表达最有利的证据是：通过胚状体分化形成完整植株。 当离体培养时，这些细胞（组织、器官）生命特征属性的表现过程和形式都将发生变化 1新陈代谢方面：培养基 2.调控能力方面：异养 3.生长发育和繁殖方面：细胞脱分化，体细胞胚发生。 4.在遗传进化方面 ：变异性增加 二、植物细胞分化 分化：指植物体各个部分出现异质性的现象，包括细胞分化、组织分化或器官分化等。 细胞分化：指在个体发育过程中，不同部位的细胞的形态结构和生理功能发生改变，形成不同的组织和器官。 细胞分化是发育生物学的核心问题，是基因选择性活化或阻遏的结果。5%-10% 细胞分化的某些规律和机理 1.可分为形态结构分化及生理生化分化； 2.不存在部分基因组永久关闭的情况； 3.离体培养可通过脱分化来丧失“细胞发育的决定” 4.极性与分化密切相关； 5.生理隔离或机械隔离在细胞分化中的促进作用； 6.细胞分裂对细胞分化具有重要作用； 7.植物生长调节剂对细胞分化具有明显的调节作用； 8.细胞核染色体和DNA的变化对细胞分化的作用； 第二节 离体条件下植物器官的发生 一、脱分化和再分化 二、影响细胞脱分化和再分化的因素 一、脱分化和再分化 （一）脱分化 1.定义 脱分化（dedifferentiaton）：去分化，指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。 2.脱分化种类 1）通过细胞分裂形成细胞团或愈伤组织； 2）本身细胞恢复分生状态，即可再分化。 脱分化也为植物界常有的现象 3.脱分化的机理 尚未清楚，诱导脱分化期间细胞学以及生理生化方面的变化：以下变化改变了细胞原有的生理状态，引起细胞分裂 膜透性改变 细胞核增大 内质网范围扩大 多核糖体形成 气体交换率增加 不同基因活化引起生长激素的分解或合成 过氧化物酶增加 蛋白和酚类物质合成活跃 乙烯产物增加 （二）再分化 1.定义 再分化（redifferentiaton）：离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官、甚至形成完整的植株的现象。 2.再分化的分类 1）细胞水平的再分化： 2）组织水平的再分化： 3）器官水平的再分化： 4）植株再生： 1.细胞水平的再分化： 细胞壁变厚、假导管细胞的形成及酶水平的变化，从而形成各种类型的细胞。 2.组织水平的再分化： 当愈伤组织在高水平生长素条件下，最常见的是维管组织的分化。 松散的愈伤组织内含有大量拟分生组织或瘤状结构； 致密的愈伤组织内组织分化很少。 3）器官水平的再分化： 又称器官发生，指再分化的组织可形成各种器官，如根、茎或芽、叶、花以及多种变态的器官。 器官发生根据起源的不同可以分为： 器官型：由外植体的细胞形成器官原基，继而发育成器官 器官发生型：先形成愈伤组织，由愈伤组织产生不同的器官原基。 离体培养下的器官原基的形成过程： 4）植株再生： 离体培养再生植株的主要途径是器官发生和胚胎发生。 器官发生： 根、茎或芽的器官发生 原球茎发生（兰花） 绿色球状体的发生（蕨类植物） 茎原基发生（菊科） 胚胎发生 根和茎或芽器官的发生可使植株重建，有三种形式 （1）先形成芽，芽的基部长根形成小植株； （2）先形成根，根上再出芽。 （3）愈伤组织的不同部位分别形成芽和根，然后形成维管组织把两者结合起来形成一个植株。一般离体培养物中先形成芽后较易形成根。 原球茎 是兰科植物的一种再生方式 ,它最初是指兰花种子萌发过程中的形态学构造 ,《植物生物学词典》(1994年 )中将之定义为植株基部由一团尚未分化的薄壁细胞组成的上端有顶端生长点和叶原基 ,下端有很多不定根、初具球茎形态的球状体 ,可理解为缩短的、呈珠粒状的、由胚性细胞组成的、类似嫩茎的原器官。另外 ,在兰科