渐危药用植物秦艽产活性成分内生真菌的初步研究.pdf

摘要 从秦艽根、茎、叶中共分离出20种内生真菌。经初步筛选，得到5株可能 发现，其中QJl8产龙胆苦苷能力较强，故以此作为供试菌株，对其做了以下的 研究。 对龙胆苦苷的薄层层析检测方法进行了筛选，发现用乙酸乙酯：甲醇：水(20： 2：1)作为展开剂，用碘熏蒸显色是较为理想的检测条件。 对QJl8菌株产生的龙胆苦苷的提取方法进行了选择和优化，制备薄层是提 纯的较理想方法。 薄层扫描等检测结果显示，QJl8提取物、龙胆苦苷标准品的紫外一可见光吸 一个峰的保留时间和龙胆苦营标准品的基本相同。QJl8提取物红外谱图存在与 龙胆苦苷结构中官能团相一致的特征峰。液质联用结果显示QJl8提取物液相色 谱图中主峰和龙胆苦苷标准品保留时间一致，QJl8提取物液相色谱图中主峰的 质谱图与标准品质谱图一致。这些结果都表明内生真菌QJl8能够产生和其宿主 相同的龙胆苦苷成分。 利于龙胆苦苷产生的基本培养基以马铃薯葡萄糖液体培养基为最佳。利用液 体培养基对其中的碳、氮源进行了筛选，结果显示，对于QJl8菌丝生长和龙胆 苦苷的产生来说，蔗糖和尿素是较理想的碳源和氮源。 通过正交实验优化了QJl8的发酵条件，得出适宜菌丝体生长的培养条件为： 震荡速度80次／min；有利于龙胆苦苷产生的培养条件是：蔗糖259·L-‘，尿素 次／mirl。 对内生真菌QJl8进行了初步的菌种鉴定，其在分类学上的地位为真菌门， 藻菌纲，毛霉目，毛霉科，根霉属。 关键词：秦艽；内生真菌；龙胆苦苷；发酵条件；菌种鉴定 studieson with Primary endophyficfungi gentiopicrinproduction vulnerable froma medicinalGentiana ability plant macrophyllapall Abstract 20 of isolatedfrom and ofa strains theroots．stemsleaves endophyticfungi vuherablemedicinalGentiana were the plant macrophyllastudied．Bydeposition with reaction and QJl8)with Dragendorff’sagent，fivestrains(QJ2，QJ8，QJl2，QJl6 alkaloid werescreenedout．Thenthestrain wasfurther productionability QJl8 selectedout thin ofits by layerchromatography㈣becausegentiopierin of extractionwas then ability．Theproceduregentiopierin optimized．And production of of theRfvalueconcentratedextractfromtheculturefiltrateQJl8was