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牛分枝杆菌检测方法的建立及应用研究.pdf

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摘 要 目的:建立一种结核分枝杆菌的双重PCR检测方法;探讨乳液在牛结核病检测中的应用价 值;利用PCR方法和PhaB法以及细菌分离培养法,对模拟样本和临床样本进行检测,探讨各种 方法的临床应用价值,为建立牛结核病快速诊断方法奠定基础。 方法:以牛分枝杆菌标准菌株,建它一种PCR扩增方法;研究PhaB法检测模拟鼻拭子样本 和细菌分离培养法应用于临床样本的检测。 的菌含量,检测时间为5h。PhaB法检测模拟鼻拭予样本的灵敏度为牛分枝杆菌活茼含量为50--一 500条/mL,24h内可判读结果。模拟乳样检测町得阳性结果。对206份临床样本进行检测,结果 的样本中分离到一株分枝杆菌,菌型鉴定结果为结核分枝杆菌,对该分离株进行PhaB法和PCR法 检测结果均为阳性。 结论:所建立的双霞PCR检测方法,特异性好,为结核分枝杆菌的快速检测提供了一可供 选择的手段;相比之下,PhaB法检测所用时问较长,但可以直接检测样本中活菌的存在,结果 更加可靠:乳液可用于牛结核病的诊断;应用于临床检测,PCR和PhaB法的灵敏度还有待进一 步提高。 关键词:牛结核病,噬荫体生物扩增法,PCR Abstract establishadouble-PCRmethodfor the tuberculosis.Discuss objective:To detecting Mycobacterium detectionvalueofemulsioninbovine thesimulatedandclinical tuberculosis.Detectingsamples specimens with asisolatedandculturedtoestablishafoundation PCRPhaB,勰well forthe of technologydiagnosis bovinetuberculosisatthe level. grassroots Methods:EstablishaPCRmethodwiththestandardstrainof the bovis.Research Mycobacterium ofPhaBin theexistenceofthebacteriafrom thesimulatednasalswab sensitivity detecting samples.Study howthePCRandPhaBusedinemulsionwithtimulated theclinical with sample.Testing PCR, samples PhaBandisolatedandculturedmethods. Results:AdoublePCRmethodwhose ismorethan to1 the is

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