JNK／SAPK和p38信号转导通路在高渗透压介导的兔髓核细胞凋亡中的作用.pdfVIP

复 里亏握 (医学版) 128 Fudan Univ J Med Sci JNK／SAPK和 p38信号转导通路在高渗透压 介导的兔髓核细胞凋亡中的作用 李方辉 薛少青 修焕娟 李桂枝 王德春化 (青岛大学医学院附属医院脊柱外科 青 岛 266003；胶南市 中医医院外二科 胶南 266300 青岛大学医学院附属医院海 阳分 院骨科 海 阳 265100) 【摘要】 目的 观察高渗透压对兔髓 核细胞活性 的影 响及 JNK／SAPK(c—JunN—terminalkinases／stress— activatedproteinkinases)和 p38信号转导通路在此过程 中的作用 。方法 根据不 同渗透压及时间段处理髓核细 胞将实验分为对照组、刺激组和阻断组后采用流式细胞仪检测各组髓核细胞凋亡情况 ，同时利用免疫荧光和 Westernblot技术检测磷酸化 p38丝裂原活化蛋 白激酶 (phospho—p38mitogen-activatedproteinkinases，P—p38 MAPK)、磷酸化 JNK／SAPK激酶 (phospho～JNK／SAPK，P—JNK／SAPK)的亚细胞定位及表达水平 ，观察其对髓 核细胞凋亡的影响。结果 高渗透压[6oomOsm／kgH 0(mOsm)~可导致髓核细胞显著凋亡及 P-p38MAPK 和 P-JNK／SAPK蛋 白表达水平改变 。600mOsm时各刺激组凋亡细胞与对照组相 比，差异均有显著统计学意义 (P0．01)，而阻断组凋亡细胞 明显减少 ；而 400mOsm 时各刺激组和阻断组凋亡细胞与对照组相 比差异均无统 计学意义；免疫荧光结果显示 P—p38MAPK和 P—JNK／sAPK在髓核细胞质和细胞核 中均有表达 ；经高渗透压 (600mOsm)刺激后P—p38MAPK和P—JNK／SAPK表达均显著高于对照组 (P0．01)，而相应阻断组 P—p38 MAPK和P—JNK／sAPK表达均显著降低。结论 高渗透压通过激活JNK／SAPK和p38信号转导通路导致体 外培养 的兔髓核细胞凋亡 ，同时髓核细胞对轻度的渗透压升高具有一定的适应性 。 【关键词】 信号转导通路； 渗透压 ； p38丝裂原活化激酶 (p38MAPK)； JNK／SAPK； 细胞凋亡 ； 兔 【中图分类号】 R329．2 【文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1672—8467．2012．02．004 TheroleofJNK／SAPKandp38signalpathwaysinapoptosisof rabbitnucleuspulposuscellsinducedbyhighosmolality LIFang—hui’，XUEShao—qing ，XIU Huanjuan。，LIGui—zhi，WANGDe—chun△ (Department0，SpinalSurgery，A iliatedHospitalofQingdaoUniversityMedicalCollege，Qingdao266003， ShandongProvince，China；DepartmentofOrthopaedics，JiaonanHospitalofTraditionalChineseMedicine， Jiaonan266300，ShandongProvince，China；DepartmentofSurgery，AffiliatedHospitaloiMedicalCollege QingdaoUniversityHaiyangBranch，Haiyang2651O0，ShandongProvince，China) [Abstract] Objective Tomakecleartheeffectofhighosmolalityonrabbitnucleuspulposusc