两份水稻花器官突变体的形态学观察、性状的遗传分析及相关基因的分子标记定位.pdfVIP

摘 要 植物生殖发育突变体的获得和研究，在揭示生殖发育相关基因的作用及其相互关 系，探明植物生殖发育，特别是花发育的奥秘中起了十分重要的作用。水稻作为单子 叶植物的代表，研究水稻生殖发育机制具有重要的理论意义和应用价值。 我们在水稻的杂交后代中发现了两份花器官发育突变体。本研究从解剖结构观察、 石蜡切片观察、扫描电镜观察、突变性状的遗传分析等方面对两份突变体花器官进行 了鉴定，并对其相关基因进行分子标记定位和等位性分析，主要结果如下： 一腩突变体的研究 1．植株形态、花器官解剖结构、石蜡切片观察及育性鉴定：长颖壳花器官突变体 来源于野生稻(o．nivaraSharmaet Shastry)和栽培稻(O．sativa 后代。与正常水稻颖花结构相比，突变体颖花的内外稃变薄、变长，呈叶状，且内稃比 外稃长，顶端表现不同程度的开裂。有些颖花内外稃之间存在多个类内外稃结构。在颖 花雄蕊和雌蕊的观察分析中，含3～5枚雄蕊的颖花约占颖花总数的90％，其中41．14％ 具2枚以上雌蕊，58．86％具l枚雌蕊：含6～10枚雄蕊的颖花约占10％，其中雌蕊几乎 皆为多枚．颖花内子房数l~4个不等，每个子房柱头数1～5个不等。约11．5％颖花形成 雌／雄蕊嵌合物。颖花内常见有瘤状物(约占34．5％)。石蜡切片观察还发现有些颖花存 在双胚珠结构。突变体另一突出特点是结实率低，其中单粒结实率为16．38％，双粒结 实率为O．75％，花粉可育率为63．23％。 2．扫描电镜观察：突变性状表型从雌雄蕊原基分化期开始表现。突变体颖花的雄 蕊原基和雌蕊原基分化无规律，一般呈不均等分裂，且出现各雄蕊发育不同步现象。 2检验』下常株与突变株的比例符合l 交组合；Fl各植株表型正常：F2群体田阍调查经x 对基因控制的分离比3：1，表明该突变性状受一对隐性基因控制，并将该基因暂命名 hull)。 为lh(10ng 4．突变基因的分子标记定位：簇粒／长颖壳材料F2群体作为定位群体。利用SSR 标记分析发现水稻第3染色体上的标记RMl57与目标性状连锁，其遗传距离为7．9cM。 5．根据双子叶花器官发育“ABC”模型推论：该突变体存在类内外稃状结构及雄蕊 部分同源异型转化为雌蕊现象，推测可能为维持B功能基因的活性部分丧失造成：同时 由颖花存在多个类内外稃、双胚珠结构及雄蕊数减少等花器官数目变异现象推测，腑基 因同时又影响花器官数目。 二mh突变体的研究 l，奇颖突变体颖花的解剖结构、石蜡切片观察及育性鉴定：该突变体来源籼稻 同程度的退化现象、内外稃不闭合．雄蕊数多为3～5枚(81．25％)，雌蕊数～般为l枚 梗上着生两朵小花．突变体颖花结实率偏低，其中单粒结实率为45．83％，双粒结实率 为5．08％。花粉可育率为68．25％。 2．扫描电镜观察：水稻正常颖花和奇颖突变体颖花的形念差异在雄蕊原基分化期 歼始表现。在正常颖花6枚发育的雄蕊中，紧靠外稃中部的l枚雄嚣发育迟缓。突变 体雄蕊数目变异，或发育不同步；雄蕊融合：穗轴分化成两朵小花等变异现象都可在 各原基分化初期观察到。 2 水稻品种配制杂交组合，各组合FI代均表现正常亲本的表型。F2群体调查结果经x 检验表明，正常植株与突变植株的分离比例符合3：l，即该突变性状受一对单隐性基 hull)。 因控制，并将该基因暂定名为mh(malformed 4．突变基因的分子标记定位：R527／奇颖突变体及反交F2群体作为定位群体。SSR 标记分析发现控制该突变性状的基因与第3染色体短臂上的标记RM282，OSRl3。 5．根据花发育的分子生物学机制推论：该突变体有多个类稃片状结构；绝大多数 小花雄蕊数为3～5枚，比正常颖花数目少，推测控制mh基因可能影响花器官数目。同 时，在同一小花穗梗上具两朵颖花的比例约为30．43％，与拟南芥中“A”类基因apetalal 突变体在4个萼片基部又着生一朵花的表型有类似之处，推测可能m^基因突变同时又 引起花序分生组织向花分生组织转化受阻。 三几份花器官发育突变体基因间的等位性分析 通过突变体表型分