拟南芥诱导性系统抗性突变体的筛选和分析.pdfVIP

拟南芥诱导性系统抗性突变体的筛选和分析 摘 要 产生植物系统性抗病性的途径主要有两条 其中 研究较为透彻 的是系统获得性抗性 SAR途径 它主要是指植物体接种病原菌后 诱导出的对病原物的广谱性抗性 在上世纪 90年代 植物体内确认了另一条途径 称之为诱导性系统 抗性 induced systemic resistanceISR途径 一些非病原性的 根际定殖的荧光假单胞菌能诱导植物产生ISR为阐明ISR途径的分 子机制 前人建立了一个基于拟南芥的研究系统 根据拟南芥不同生 态型产生ISR能力的差异 发现了一个位于第三条染色体上参与ISR 信号途径的位点 ISR1拟南芥生态型RLD和 在 ISR1位点为隐性突变 不能产生 ISR由于ISR途径发现较晚 对该途径的信号传递了解甚少 为了进一步研究 ISR产生的分子机 制 我们对已有的诱导植物产生系统抗性的方法作了改进 并在此基 础上 进行了拟南芥ISR途径突变体的大规模筛选 并获得了一个拟 南芥Columbia生态型背景的ISR突变体 e44利用荧光假单胞菌 M18菌株的菌悬液处理植株根部 仅能诱导出野生型植株对叶部病原 菌丁香假单胞菌番茄变株 ( pv. tomato)DC3000产生抗性 而 e44对DC3000的感染表现敏感 说明 e44丧失了产生ISR的能力 e44植株与野生型植株(Columbia)杂交的F1代 具有正常的表 达ISR的能力 在F2代群体中能够正常表达ISR与无法正常表达ISR 的植株的分离比约为3 1 表明 e44是一个单基因隐性的ISR途径 突变体 e44与突变体RLD-1(ISR1位点突变)杂交 F1代植株恢复 了表达ISR的能力 表明e44突变体携带一个新的ISR途径的突变位 点 关键词 拟南芥 荧光假单胞菌M18,诱导性系统抗性 ISR突变 体e44 Resistance mutants in ABSTRACT Two different forms of systemic resistance have been discovered in higher plant. A well characterized one is called the systemic acquired resistance (SAR), by which the systemic resistance is induced by infection with a necrotizing pathogen. Another one, termed the induced systemic resistance (ISR), was found in early 1990s, by which treatment with some strains of nonpathogenic, root-colonizing fluorescen t p seudomonas bacteria can trigger the systemic resistance in plant. To elucidate the molecular mechanisms underlying the ISR, a mutant screening system was developed using Arabidopsis . According to the variability of ISR induction among Arabidopsis ecotypes, a locus (ISR1) on chromosome III involved in ISR signaling pathway was identified. Arabidopsis ecotypes RLD and Wass