电喷雾质谱新原理和新技术.pdfVIP

——一．． 墟篓(垒自￡￡盥￡f2 摘要 Ionization Mass Spectrometry)在分析科学，特别是蛋白质等生物大分子鉴定分 析领域已越来越凸现出举足轻重的作用。ESI的显著优点是被分析离子可带多 电荷，从而大大拓宽了质谱的质量测定范围。该技术的出现，是生物大分子测 定技术的重要突破，它使得质谱得以提供生物大分子的精确质量信息，从而奠 定了生物质谱在生物领域的关键地位。电喷雾离子化的另～显著优势是其离子 化过程中的“软”电离特征，甚至以相对较弱的作用力(如氢键)维持结构的 ＼．—_厂 大分子复合物，也能够被检测到。泪前，电喷雾质谱的主要发展方向立足于以 ， 下三点，即：高灵敏度，高精确度以及高通量。 因应上述电喷雾质谱的主要发展方向，本论文主要完成了脉冲电喷雾和双 喷头内标法蛋白肽谱测定等两方面的研究工作，对于电喷雾质谱检测灵敏度的 提高和测定准确度的改善将起十分重要的作用。 f (针对传统电喷雾离子源连续喷雾产生离子以及后续质谱仪器“不连续”的 ＼ 检测原理，借鉴成功的脉冲型辉光放电离子源，作者开创性地提出并初步实现 了脉冲电喷雾原理测试。经过喷雾装置制作、喷雾条件优化、脉冲电喷雾实现 及其改进、脉冲电喷雾甲红霉素样品质谱数据采集等实验步骤，证实的确在脉 冲条件下观察到了电喷雾的间断进行，脉冲条件为频率O．8赫兹、脉宽50毫 秒，流速80纳升／分钟。我们预期，脉冲电喷雾技术将在降低测定流速、节约 样品，提高质谱检测信噪比，以及优化电喷雾．飞行时间质谱联接等方面起重要 的作用。 1，—／ ／ 本论文作者还创造性地将国际分析测试领域已经成功实现的双喷头精确测 定有机物分子量技术，与蛋白组学研究迫切的高准确度测定蛋白质酶切产物 (小肽)分子量以便快速准确鉴定蛋白质种类的需求相结合，采用双喷头内标 法准确测定马肌红蛋白的酶切肽谱，并通过国际共用数据库搜索证明该方法确 —— 擅星f垒丝f塑型 实能够有助于提高蛋白鉴定分析的准确度和工作效率。戡们希望，在今后的研 究工作中，尽快在新兴的芯片分析平台上开发双喷头系统，以期实现蛋白酶 切、分离、精确肽段测定的整体芯片化。这是具有国际先进水平的研究工作， 对于蛋白组学的发展具有广泛深远的应用意义。 )———万 7 X 关键词： 质谱，脉冲电喷雾，双喷头内标法 篮l耋c4＆￡￡￡g￡型 ABSTRACT Sinceitwasfirst inlate1 mass reported980’S，the ESI—MS(electrosprayspectrometry) hasbeen moreandmore in in showing importance analytical science，especially identificationandcharacterization macromoleculessuchas ofbiological proteins．One essential of