贲门癌端酶活性与肿瘤相关基因表达临床生物学意义及其相关性的研究.pdfVIP

贲门I静雠蛔嘲摧与舯癣概逛暾嗽 的临床生物学意义及其相关性研究 摘要 目的t端粒酶与肿瘤的关系正逐渐为人们所重视，以端粒酶为 靶点的研究也日益广泛。近年来发现，在多种肿瘤的癌前病变 及肿瘤进展期均有端粒酶活性的表达，但关于贲门癌中端粒酶 活性表达的情况未见报道。本研究应用PCR--ELISA法测定 责门癌组织中的端粒酶漪陛，以观察端粒酶与贲门癌的临床生 物学特性的关系，探讨其作为贲门癌肿瘤标记物的可能性，并 用于贲门癌的早期诊断，同时应用间接免疫荧光流式细胞定量 分析技术检测P53、PCNA和nm23-H．蛋白在贲门癌组织中的 表达，旨在研究三种基因的表达与贲门癌I臁生物学行为的关 系，并探讨其与端粒酶活性的相关性，从而对贲门癌的发展、 转移及预后进行预测，为选择治疗方案和评价预后提供理论依 据。 q羽掣季方i去l随机选择30例贲门癌组织、30例癌旁组织、30 例标褐剡携垮『汲10例正常贲门组织，每酬莉盼戚两盼， —份液氮速冻，后转至-80C冰箱贮存备用，另—份经10％中 性福尔马林固定，石蜡包埋。所有标本均经病理确诊。使用端 粒酶PCR--ELISA试剂盒。第—抗体为l：100的鼠吭人P53 单克隆抗体、1：100的鼠虎人PCNA单克隆抗体和1：100的 鼠抗人nm23-Hl单克隆抗体，第二抗体为1：20的羊抗鼠 FTrC电G抗体。结果判定：以吸光度值之差(△A)作为端粒酶 活性的表达指标，以荧光指数(F1)作为P53和nm23-H．蛋白 定量表达j：旨标，以PCNA标记指数(PCNA u)作为PCNA 的表达指标。 ． 结果·1、在正常组织中未检测到端粒酶活性的表达；在残端 组织中检测到4例端粒酶阳性，阳性率为13．3％；在癌旁组 织中检测到20例端粒酶阳性，其阳性率为66．7％；在贲门 癌组织中检测到28例端粒酶阳性，阳性率为93．3％。其中 残端组织、癌旁组织和责门癌组织中端粒酶的阳性表达率均明 显高于正常组织(P均0．01)。2、端粒酶活性与患者的性 别、年龄、肿块大小、分化程度、浸润深度、临宋分期及 有无淋巴结转移无关(P均O．05)。3、P53蛋白在癌旁组 织和贲门癌组织中表达量分别为1．129±0．140和1．703± 0．664，癌旁组织高于正常组织(P0．05)；而贲门癌组织 明显高于正常组织和癌旁组织(P0．01)。4、P53蛋白在 贲门癌III期的表达量为1．789±0．829，高于I、II期(1．635 ±0．525)(P0．05)；淋巴结转移组的P53蛋白表达量为 1．789±0．829，高于无淋巴结转移组1．635±0．525 (P0．05)。5、P53蛋白的表达与贲门癌患者的性别、年 龄、肿块大／』、、多卜“翻翌压￡和浸润彩蘸度无关(PO．05)。6、 PCNA标记指数在贲门癌组织中为18．460±6．370，而在癌 旁组织和正常组织中分别为17．925±5．097和13．900-4- 3．961，贲门癌组与正常组相比有非常显著差异(P0．01)， 癌旁组与正常组相比有显著差异(PO．05)。7、PCNA标 记指数在肿块直径3cm组为14．163___3．782，高于肿块直 中为15．478±2．671，高于分化差的肿瘤组织12．415±3．436 淋巴结转移组的PCNA标记指数为15．064±3．870，高于 标记指数与贲门癌患者的性别、年龄及浸润深度无关(P 0．05)。9、nm-23H,蛋白在贲门癌组和癌旁组的表达量分别 为1．865±O．285和1．328±0．250，均明显高于正常组(P O．01)；同时贲门癌组的表达量也明显高于癌旁组(P 0．01)。10、nm23-H。蛋白在贲门癌侵及肌层组的表达量为 1．894±0．287，高于侵及浆膜及浆膜外组1．712±0．296 (P0．05)；在贲门癌III期的表达量为1．709±0．293，低 中的表达量为1．709±0．293，低于无淋巴结转移组1．977 者的性别、年龄、need,及分化程度无关(P0．05)。12、 阳性希鹳端粒酶活性的表达呈正相关(Po．05)。，丈 结论l 1、端粒酶活性、P53蛋白、PCNA和nm23-1q。蛋白在 贲门癌组织和癌旁组