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目录
摘要……………………………………………………………………………………………．
Abstract……………………………………………………………………………………………………………………………………．．：!
英文缩略表…………………………………………………………………………………………………3
1文献综主盎…………………………………………………………………………………．……………………………………………．．4
1．1奶牛育种现状……………………………………………………………………………………………4
1．2分子标记………………………………………………………………………………………………………………………………5
1．2．1限制性片段长度多态性(RFLP)…………………………………………………………………．6
1．2．2小]三星(minisatelliteDNA)………………………………………………………………………………………………6
1．2．3微卫星(microsatelliteDNA)……………………………………………………………………．6
1．2．4随机扩增片段多态性DNA(RAPD)……………………………………………………………．．7
1．2．5扩增片段长度多态性(AFLP)……………………………………………………………………。7
1．2．6SNP标记……………………………………………………………………………………………………………………………．．7
1．3遗传标记在家畜育种中的应用………………………………………………………………………。8
1．3．1构建基因图谱…………………………………………………………………………………………8
1．3．2基因定位………………………………………………………………………………………………8
1．3．3分子标记辅助选择…………………………………………………………………………………。9
1．4SLC27AI基因概述……………………………………………………………………………………10
1．4．1
SLC27A1分子结构…………………………………………………………………………………．10
1．4．2SLC27A1生物学功能………………………………………………………………………………．1l
1．4．3奶牛SLC27AI基因结构及研究进展………………………………………………………………11
1．5本研究的目的和内容…………………………………………………………………………………12
2材料与方法……………………………………………………………………………………………。13
2．1试验材料………………………………………………………………………………………………13
2．1．1试验动物……………………………………………………………………………………………13
2．1．2主要仪器…………………………………………………．．．…………………………………………13
2．1．3试验试剂……………………………………………………………………………………………．14
2．1．4主要试剂的配制……………………………………………………………………………………．14
2．2试验方法………………………………………………………………………………………………16
2．2．1奶牛血凝块基因组DNA的提取……………………………………………………………………16
2．2．2
DNA纯度测定与电泳检测…………………………………………………………………………17
2．2．3SLC27A1基因序列的查找与引物设计……………………………………………………………。18
2．2．4PCR扩增…………………………………………………………………………………………………………………………。19
2．2．5
SSCP检测…………………………………………………………………………………………………………………………．19
2．2．6
PCR扩增产物的回收纯化…………………………………………………………………………．19
2．2．7克隆测序……………………………………………………………………………………………．20
2．2．8酶切位点查找…………………………………………………………………………………………20
2．2．9PCR-RFLP………………………………………………………………………………………………………………………．．20
2．2．10统计分析………………………………
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