腱组织提取物对大鼠脂肪来源间充质干细胞增殖和向肌腱细胞分化影响.pdfVIP

腱组织提取物对大鼠脂肪来源间充质干细胞增殖和向肌腱细胞分化影响.pdf

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摘要 研究目的 探讨腱组织提取物对ADSC增殖和向肌腱细胞方向分化的影响, 从而为肌腱组织工程及其最终应用于临床提供理论依据。 研究方法 从3周龄SD大鼠腹股沟脂肪垫分离出脂肪组织,通过I型胶原 酶消化法分离干细胞,接种于含有胎牛血清的DMEM培养基中分离 传代。每日以倒置显微镜观察细胞形态及生长情况,MTT法绘制 ADSC生长曲线。经鉴定后,取第三代ADSC分成实验组和对照组2 后继续培养观察。采用MTT比色法进行增殖活性比较,I型胶原免 疫细胞化学染色检测成肌腱分化情况以及RT-PCR检测肌腱发育相关 基因(CollagenI、CollagenIⅡ基因)的表达。 研究结果 原代细胞接种4.6小时后即可见沉降贴壁,7.8天左右可见大量 增殖,按一定方向性排列,呈漩涡状或束状,传代后细胞增殖迅速, 生长稳定。腱组织提取物诱导后,MTT实验显示ADSC增殖活性并 未发生明显改变,与对照组间没有统计学差异(po.05)。行I型胶原 免疫细胞化学染色显示:实验组为阳性,对照组阴性;lmPCR检测 显示肌腱发育相关基因(Collagen 加(p0.01)。 研究结论 1.腱组织提取物不能改变大鼠ADSC的增殖活性 2.腱组织提取物可以促进大鼠ADSC向肌腱细胞方向分化 关键词腱组织提取物,脂肪来源间充质干细胞,增殖,分化 lI AB STRACT ectiVe: obj Tb t11einfluence inVestigate tothe andits pr01if跏on totendoncellsof ADSCwhen仃eated、加th tendontissues ex仃acts,then ascientific proVide basisf.0rtendontissue and itsultimate engineering clinical applicatiOn. MethOds: 3weeksoldSD tissue疔omits rats,isolateadipose fat inguinm padS, theIl isOlate st锄cells I t11e by stemcellsin Collagen弱edigestion,seeded DMEMmediumwhich containsfetal bo访nesemmf.0r and separation s

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