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摘要
研究目的
探讨腱组织提取物对ADSC增殖和向肌腱细胞方向分化的影响,
从而为肌腱组织工程及其最终应用于临床提供理论依据。
研究方法
从3周龄SD大鼠腹股沟脂肪垫分离出脂肪组织,通过I型胶原
酶消化法分离干细胞,接种于含有胎牛血清的DMEM培养基中分离
传代。每日以倒置显微镜观察细胞形态及生长情况,MTT法绘制
ADSC生长曲线。经鉴定后,取第三代ADSC分成实验组和对照组2
后继续培养观察。采用MTT比色法进行增殖活性比较,I型胶原免
疫细胞化学染色检测成肌腱分化情况以及RT-PCR检测肌腱发育相关
基因(CollagenI、CollagenIⅡ基因)的表达。
研究结果
原代细胞接种4.6小时后即可见沉降贴壁,7.8天左右可见大量
增殖,按一定方向性排列,呈漩涡状或束状,传代后细胞增殖迅速,
生长稳定。腱组织提取物诱导后,MTT实验显示ADSC增殖活性并
未发生明显改变,与对照组间没有统计学差异(po.05)。行I型胶原
免疫细胞化学染色显示:实验组为阳性,对照组阴性;lmPCR检测
显示肌腱发育相关基因(Collagen
加(p0.01)。
研究结论
1.腱组织提取物不能改变大鼠ADSC的增殖活性
2.腱组织提取物可以促进大鼠ADSC向肌腱细胞方向分化
关键词腱组织提取物,脂肪来源间充质干细胞,增殖,分化
lI
AB
STRACT
ectiVe:
obj
Tb t11einfluence
inVestigate tothe andits
pr01if跏on
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ADSCwhen仃eated、加th
tendontissues
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proVide basisf.0rtendontissue and
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engineering
clinical
applicatiOn.
MethOds:
3weeksoldSD tissue疔omits
rats,isolateadipose fat
inguinm
padS,
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isOlate
st锄cells I t11e
by stemcellsin
Collagen弱edigestion,seeded
DMEMmediumwhich
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