胸苷酸合成酶基因多态性与食管癌、贲门癌的关联研究.pdf

中文 摘 要 胸昔酸合成酶基因多态性与食管癌、责门癌的关联 研究 摘 要 目的:食管癌和责门癌是我国发病率较高的肿瘤。由于 这两种肿瘤确诊时多处于中晚期，术后五年生存率很低，因 此确定高危人群，实现早期诊断是提高其生存率的有效途 径。食管癌和赏门癌的发病与亚硝胺类化合物、营养缺乏、 不良饮食习惯、吸烟、饮洒、霉菌感染等因素有关。然而， 并非所有暴露于这些环境危险因素的个体均患食管癌、贪门 癌。这说明除环境因素外，一定的遗传背景是这些肿瘤发生 的重要因素。 胸普酸合成酶 (thymidylatesynthase,TS)是DNA合成 的关键酶，它催化脱氧尿普酸 (dUMP)甲基化，使之转变 为脱氧胸葺酸((dTMP)，在DNA合成与修复中起重要作用， 也是主要化疗药物的靶向酶。TS基因多态性可影响TS在细 胞中的转录、表达效率，因此，对TS基因多态性与肿瘤发 生、发展关系的研究将对肿瘤的预防和治疗具有重要指导意 义。 本研究旨在探讨 TS基因 5，非翻译区 (untranslated region,UTR)的串联重复序列及G/C单核普酸多态性和 TUTR的6bp缺失或插入多态性对食管鳞状细胞癌 (esophagealsquamouscellcarcinoma,ESCC)和责门腺癌 (gastriccardiacadenocarcinoma,GCA)发生及淋巴结转移 的影响。 中 文 摘 要 方法:采用基于医院的病例一对照研究方法，收集 465 例肿瘤患者 (232例ESCC,233例GCA)和348例健康对 照个体，采集静脉抗凝血5m1，同时收集其病史、个人史、 肿瘤家族史。以蛋白酶K消化一饱和氯化钠盐析法提取外周 血白细胞DNA，分别用聚合酶链反应 (polymerasechain reaction,PCR)一片段长度分析和PCR一限制性片段长度多态 性 (restrictionfragmentlengthpolymorphismanalysis,RFLP) 力一法检测 TS的三种多态性基因型。对 12个显示不同TS 5UTR串联重复序列基因型的标木进行了DNA测序。以光 镜下显微切割方法，分离66例ESCC患者石蜡包埋手术标 本中的肿瘤组织和正常食管粘膜组织，并以蛋白酶K消化法 分别提取其DNA,PCR一片段长度分析方法检测ESCC组织 中TS基因的杂合缺失(lossofheterozygosity,LOH)情况。 对51例ESCC患者石蜡包埋的手术标本，采用免疫组织化 学染色方法检测其TS蛋白的表达。 数据统计分析采用SPSS12.0版软件包(SPSSCompany, Chicago,Illinois,USA)进行，P0.05认为有统计学意义。经比 较各位点基因型频率的观察值与预期值并进行卡方检验行 Hardy-Weinberg平衡分析。病例组与对照组的基因型分布比 较采用行X列表卡方检验。单体型频率及连锁不平衡分析采 用EH软件和2LD软件 (1.2version,RockefellerUniversity, NewYork)。以非条件Logistic回归法计算经年龄、性别校正 的相对风险度比值比(oddsratio,OR)及其 95%可信区间 (confidenceinterval,Cl)。 结果:1ESCC和GCA患者组中上消化道肿瘤 (upper gastrointestinascancers,UGIC)家族史阳性者的比例(分别 中文 摘 要 为31.0%和34.3%)显著高于健康对照组(4.2%)(才=39.01 和46.00,P0.0001).ESCC和GCA患者f[1_的吸烟者比例 (56.9%和 56.7% )与健康对照组 (48.6%)相比无显著 性差异(X2=3.53,P=0.06和才=3.33,P=0.07). 2健康对照组、ESCC组和GCA组中的TS多态基因型分布 均符合Hardy-Weinberg平衡 (P0.05)，三组的5UTR 3G/3G,3G/3C,3C/3C,2R/3G,2R/3C,2R/2R和罕见 基因型频率分别为 17.5%, 17.3%,