植物与病原菌互作和抗病性的分子机制_刘胜毅.docVIP

中国农业科学　1999, 32( 增刊) : 94～102 S cien tia A gricul t rua Si nica 植物与病原菌互作和抗病性的分子机制*  1 1  2  ( 1 中国农业科学院油料作物研究所, 武汉　430062; 2 中国农业科学院植物保护研究所) 提要　概 述了近几年在寄主 植物抗病 基因与防卫 反应基因、病原菌 毒性基因、寄主抗 病性 机制和抗 病基因工程策略等 方面取得的主 要进展, 重点分析 了抗病反应 的一般过程 、毒性 基因 产物胞外水解酶和毒素的作用与关系、作物抗毒素基因工程策略。 关键词　植物; 抗病基因; 防卫基因; 毒性基因; 基因工程策 略 早在 40 年代末 50 年代初, F lor ( 1947; 1955) 在对亚麻和亚麻锈菌互作的遗传规律研究 中, 提出了基因对基因假说( g ene-for -gene hy pot hesis) 〔4, 5〕 的认识深入到了基因水平, 从而为应用分子生物学手段研究植物抗病性奠定了基础。本文概 要地综述近几年在寄主植物抗病基因、病原菌致病基因、寄主抗病机制等方面取得的主要进 展, 并试图侧重分析概括抗病反应的一般过程及毒素的作用与基因工程策略。 1　抗病相关基因 根据基因的作用性质, 可把抗病反应过程中起作用的基因分为两类: 抗病基因和防卫反 应基因。抗病基因是决定寄主植物对病原菌的专化性识别, 并激发抗病反应的基因。即按 Fl or 的基因对基因理论, 它与病原菌的无毒基因互补; 按 Keen( 1990) 提出的用来解释基因 对基因理论分子机制的配体-受体模型〔6〕, 它的产物是抗病反应信号传导链的起始组分, 即 信息链的前端, 当它与病原菌的无毒基因直接或间接编码产物互补结合后, 启动信号传导激 发植物的抗病反应。防卫反应基因是一类在抗病机制中最终起作用的基因, 它们的编码产物 直接或间接地作用于病原。除此之外, 抗病基因和防卫反应基因的区别还有: ( 1) 抗病基因编 码产物具有特异性, 而防卫反应基因编码产物具有普遍性, 即不同的寄主植物中有一套类似 的防卫反应基因, 如植保素合成链中的酶基因、病程相关( P R) 蛋白基因、植物细胞壁成分合 成酶基因等。( 2) 抗病基因产物是植物防卫反应基因表达的直接或间接调节因子。防卫反应 基因一般是受病原菌诱导表达的, 编码产物比较容易分离的一类基因, 而抗病基因是组成型表达 的, 编码产物不容易分离的一类基因。因此在基因克隆、基因编码产物的结构和功能分析等方面 的研究工作中, 防卫反应基因均早于抗病基因。所以植物防卫基因既有普遍性, 又有特殊性。除有 一部分是相似的外, 还有一部分是不同的, 如对真菌、细菌毒素的解毒基因, 因毒素不同而不同。 而人工赋予植物的解毒基因则可能更加不同, 有动物源的, 也有微生物源的。 1. 1　抗病基因 接收病原菌信号, 启动植物抗病反应信号转导的是植物抗病基因的编码产物, 这是分子 植物病理学研究寄主植物的重点和难点。自 1992 年应用转座子标签法分离出第一个抗病基增刊 刘胜毅等: 植物与病原菌互作和抗病性的分子机制 95  因 H m 1〔7〕, 1993 年应用作图克隆法分离出第二个抗病基 因 Pto 后〔8〕, 现已至少分离出 16 个 抗病基因( R 基因) 〔9, 10〕。这些基因的克隆为人们从分子水平上揭示植物抗病的内在机理以 及植物的信号传递机制, 并通过基因工程利用 R 基因快速培育新的抗病作物品种奠定了基础。 尽管 R 基因之间的序列同源性很低, 但是这些 R 基因编码的蛋白也具有一些相似的结构特 〔9, 10〕 〔10〕 L RR 结构域, 位于细胞质内的典型的丝氨酸-苏氨酸激酶( Ser-T hr kinase) , 通过丝氨酸和 苏氨酸残基的磷酸化来传递信号。目前已经有证据表明 Pt o 蛋白能与相应无毒基因 av rP to 的产物相互作用。( 2) L RR-T M 类 R 基因的基因产物为锚定于细胞膜上的糖蛋白受体, 包 括三个区域: L RR 结构域, 跨膜区域( t ransmembrane domain , T M ) 和很短的胞内区域( 仅 有数十个氨基酸残基) 。信号肽决定了它是胞外输出的。( 3) NBS-L RR 类 R 基因的共同特点 是: 在它们编码蛋白的近 N 端处存在着核苷酸结合位点( nucl eot ide binding site, NBS) 。而 在它们的近 C 端则存在着富含亮氨酸的重复序列( leucine-rich repeat , L RR ) 。L RR 是蛋白 与蛋白相互作用的一种典型结构, 它是由十多个 B折叠-环-A螺旋基