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一氧化碳中毒动物模型复制 和形态学技术实验 形态学中心实验室 贾雪梅 1.掌握形态学实验技术基本方法和技能 2.熟悉一氧化碳中毒模型复制的基本程序 3.熟悉实验论文撰写的方法与步骤 4.了解图像分析和激光共聚焦显微镜技术应用 目的和要求 实验内容 通过一氧化碳中毒实验,了解复制动物模型基本过程； 通过尼氏体染色，观察一氧化碳中毒对动物大脑皮质神经元结构的影响； 通过免疫组化染色，观察一氧化碳对神经元内神经营养因子活性的影响； 通过图像分析，对免疫组化染色结果进行定量分析。 技术路线 实验组 对照组 取材 石蜡包埋 切片 Nisslbody染色 免疫组织化学染色 共聚焦显微镜 图像分析技术 一氧化碳中毒模型复制 未处理 一氧化碳中毒实验 目的和要求 1．熟悉一氧化碳中毒实验方法及 操作技巧。 2．掌握一氧化碳吸入所致大脑皮层 结构的形态学变化。 原 理 一氧化碳中毒，红细胞内血红蛋白与一氧化碳结合，而与氧结合能力降低，进而导致组织缺氧。 脑组织缺氧可导致脑体积增大，脑沟变浅，脑回增宽，切面见点状出血；小灶状坏死；神经元变性、坏死；小胶质细胞增生、肿胀、吞噬脂质而呈泡沫状等一系列病理变化。 材 料 1．动物：小鼠或大鼠； 2．器材：手术刀、手术剪、解剖镊、 试管、广口瓶、制做切片的系列 仪器和设备； 3．试剂：一氧化碳； 操作步骤 1．将动物分为2组， 把小鼠放入广口瓶内； 2．实验组动物： 给予一氧化碳吸入， 待小鼠出现明显呼吸困难、 烦躁、晕厥时开瓶塞， 使小鼠苏醒； 对照组动物： 不吸入一氧化碳； 3．第二天重复上述操作， 连续四天， 致小鼠急性中毒死亡； 4. 切开小鼠皮肤， 用钳子打开颅骨， 暴露脑组织； 5．分离脑膜后，进行大体观察： * 脑体积变化， * 脑沟变化， * 脑回变化， * 有无出血、坏死灶； 6．取出脑组织， 置于固定液24H；
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