原创力文档- 1、本文档共5页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
2012-02-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2012.00065 /
Chin J Appl Environ Biol 2012 18 ( 1 ) : 065~069
应用与环境生物学报 ，
杂合抗菌肽LPCB在毕赤酵母中的
表达条件优化*
1 1 1 1, 2 1 1 1 1**
李增婷 谢 力 冯顺利 尤芳芳 何桂桦 林 强 曹 毅 乔代蓉
1
（四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室 成都 610065）
2
（漯河出入境检验检疫局 漯河 462000）
摘 要 为获取能表达具有天然活性的杂合抗菌肽的重组酵母菌，确定其最佳表达条件，将构建好的重组酵母表达
载体pPICZα-A-CecropinB （1~10）-Magainin2 （1~12）（简称pPICZα-A-CBMA ）和pPICZα-A-Lfcin-Pro-CecropinB （简称
pPICZα-A-LPCB ）经Sac Ⅰ线性化处理，分别电转入巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris X-33 ，利用抗生素Zeo�in筛选阳性
克隆，PCR扩增验证，甲醇诱导表达 . 采用抑菌圈法初步测定产物活性，优化杂合肽 LPCB诱导时间、诱导剂浓度、诱
导温度、培养基�H等表达条件，传代检测其质粒稳定性. 结果显示，基因工程菌P. pastoris X-33/pPICZα-A-CBMA 和P.
pastoris X-33/pPICZα-A-LPCB成功构建 . 表达产物前者抑菌活性微弱，后者抑菌活性良好. 杂合肽LPCB的最佳表达条
件为：25 ℃，�H中性培养，每24 h添加0.5% （V/ V，φ）甲醇，诱导表达72 h. 重组酵母菌pPICZα-A-LPCB在培养超过 100代
后，未发生质粒丢失 . 图4 参20
关键词 杂合抗菌肽；Lfcin-Pro-CecropinB ；毕赤酵母；表达条件优化
CLC Q936 : Q78
Optimization of Expression Conditions of Hybrid Antimicrobial Peptide
LPCB in Pichia pastoris*
1 1 1 1, 2 1 1 1 1**
LI Zengting , XIE Li , FENG Shunli , YOU Fangfang , HE Guihua , LIN Qiang , CAO Yi QIAO Dairong
1
( Microbiology and Metabolic Engineering Key Laboratory of Sichuan Province, College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610065, China)
2
( Luohe Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Luohe 462000, Henan, China)
Abstract ��oo ��o
文档评论（0）