利用UHPLC联用三重四极杆质谱仪同时高灵敏度测定酒中.pdf

利用UHPLC 联用三重四极杆质谱仪同 时高灵敏度测定酒中的多种真菌毒素 应用简报 食品 作者 摘要 韩深、刘萤、王珮玥、王金花 本文开发了一种可同时测定葡萄酒中八种真菌毒素的方法，包括黄曲霉毒素 、 、 B1 B2 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 和 、展青霉素、呕吐毒素、赭曲霉毒素 以及 玉米赤霉烯酮。在氯化钠和硫酸镁 G1 G2 A 中国北京 存在的条件下，采用乙腈对样品进行初步提取。采用旋转蒸发法对得到的提取物进行浓 吕美玲和周珊 缩，然后进行复溶，再利用超高效液相色谱(UHPLC) 三重四极杆质谱多反应模式(MRM) 安捷伦科技 中国有限公司 检测。结果表明在红葡萄酒和白葡萄酒中八种真菌毒素的检测限(LOD) 分别在 0.050 至 ( ) 中国北京 3.3 µg/L 和0.030 至8.0 µg/L 范围内，定量限(LOQ) 分别介于0.15 至2.5 µg/L 和0.10 至25 µg/L 范围内。对于全部八种真菌毒素，在选定的两个数量级的基质匹配校准范围 内线性响应良好，线性回归系数为 0.995 或更高。对于所测定的两个加标水平，回收率 介于 59.6– 132.4% ，精密度(RSD) 介于 1.2–21.1% (n = 6)。其中，大部分加标样品的回 收率为70%– 120% ，RSD 小于 10%。本文开发的方法快速、准确、灵敏，可用于葡萄酒 中多种真菌毒素的高通量常规筛查，并可能扩展到其它发酵酒类样品的应用中。 前言 实验部分 真菌毒素是由各种真菌在适宜的气候条件下自我复制而生成的一 试剂、化学品和样品 系列次级代谢产物。已见诸报道的真菌毒素有 300 余种。研究表 八种真菌毒素包括展青毒素(PAT)、呕吐毒素(DON)、黄曲霉毒素 明一些真菌毒素会导致多种不良健康效应，包括抑制免疫系统， G1 (AFG1)、黄曲霉毒素G2 (AFG2)、黄曲霉毒素B1 (AFB1)、黄 诱发癌症及畸形，干扰生长发育，等等 [1,2]。用于酿酒的农产品 曲霉毒素B2 (AFB2)、赭曲霉毒素(OTA) 以及玉米赤霉烯酮(ZEN) （例如葡萄）在生长、储存和加工过程中易感染真菌，进而受到真 （纯度大于等于99%）均购自Romer 实验室 （澳地利）。甲酸和乙 菌毒素的污染。 酸铵分别购自美国天地及赛默飞世尔科技公司。红葡萄酒和白葡 赭曲霉毒素A (OTA) 是葡萄酒中最常见的一种真菌毒素 [3-5]。欧 萄酒均为进口葡萄酒，从当地进口商处随机选择。 盟 (EU) 规定酒中OTA 的最高限量为 2 µg/L。事实上许多其它的 真菌毒素化合物的标准溶液制备采用纯甲醇配制，储备溶液浓度 真菌毒素也可能存在于酿造完成的酒中，例如黄曲霉毒素 （ 、 B1