VEGF-165-GMs复合自体颗粒骨修复兔陈旧性桡骨缺损实验的研究.pdfVIP

VEGF一165一GMs复合自体颗粒骨修复 兔陈旧性桡骨缺损的实验研究 摘要 【目的】 骨缺损一直是骨科临床治疗的棘手问题。自体骨移植仍是目前临床最常用， 而且是公认的具有良好骨修复效果的方法，是骨缺损治疗的搿金标准一。但在实 际的骨缺损修复过程中，许多组织内外因素将从细胞、分子以及基因水平影响或 干扰修复过程，从而难以达到理想的临床治疗目标。血管化是骨移植后骨修复的 重要环节。组织器官移植在植入人体后能否发挥最大作用，很大程度取决于其与 宿主的血运建立。陈旧性骨缺损周围软组织以炎症瘢痕纤维组织增生为主，其受 床血供较差，所以临床上一些骨缺损患者虽用骨质量较好的自体骨进行移植治疗 仍可能再次出现骨延迟愈合或骨不连。其主要原因之一就是术后血供未能有效建 立。如何能使移植骨骼发挥最大生物学效应，是一个值得研究的课题。本实验研 endothelial 究旨在探讨血管内皮生长因子一165明胶缓释微球(vasular groWth 、，EGF．165—GMs)复合自体颗粒骨修复陈旧 factor—165一gelati咖ierospheres， 性兔桡骨缺损是否可改善局部的血运，从而促进陈旧性骨缺损的修复，为临床应 用提供理论依据。 【方法】 (1)采用改良的双相乳化冷凝交联法制备vEGF-165一GMs，并检测其形态，粒径，载 药率及体外缓释规律； (2)制作与临床陈旧性骨缺损病理改变相似的兔桡骨陈旧性缺损动物模型，并通 过病理学及影像学验证； (3)使用vEGF-165—GMs复合自体颗粒骨修复兔桡骨缺损进行实验研究，不同时间 点处死动物行大体、影像学、生物力学、骨密度、组织学、血管密度检查。 用SPSSl3．0建立数据库并对结果进行统计分析。 【结果】 (1)改良双相乳化冷凝交联法制备rhVEGF-165—GMs检测结果 形态及粒径：扫描电镜观察固化后的微球表面均匀、圆整，表面有三维网格 状结构，复合vEGF-165后表面三维网格状结构封闭。经图像分析仪检测，直径 为35～10l衄，平均直径为68．6衄，其中80％微球粒径位于55皿～78衄。载药率： 微球载药率为0．2％，即每毫克微球中含2ug。体外释药实验：释药结果表明 vEGF-165—GMs微球的体外释药符合双相动力学释药规律，即初相为快速释药相， 后相为缓释相。体外释药曲线可见90％的VEGF_165在10天左右释放完成。 (2)动物模型制作结果 8周见骨缺损区无骨性连接，断端硬化，髓腔封闭，断段为纤维瘢痕组织填 塞。病理和影像学改变与临床陈旧性骨缺损病理改变相似，合乎实验动物模型的 要求。 (3)VEGF_165—GMs复合自体颗粒骨修复兔桡骨缺损结果 VEGF．165—GMs复合自体颗粒骨组和单纯自体颗粒骨组均能较好地修复陈旧 性骨缺损，、『EGF一165—GMs复合自体颗粒骨组具有更好更快的骨修复功能，具体 表现为术后血运重建、早期血管形成、移植骨存活、软骨内成骨量、骨骼改建塑 性质量及速度等方面优于对照组。 【结论】 (1)探索出VEGF-165—GMs的有效制备方法，所得方法制备工艺稳定，重复性好， 实验证明其具有良好的缓释效果。 (2)VEGF一165—GMs复合自体颗粒骨修复陈旧性骨缺损可以明显促进局部血运重 建，提高血管密度，诱导新生血管形成，保留移植骨细胞活性，促进新生 骨形成，提高骨改建塑形的速度和质量。 【关键词】 骨修复； 骨移植； 陈旧性； 骨缺损；血管内皮生长因子一165； 明胶： 缓释微球； 自体颗粒骨。 2 obSoIete陷diaIdefecbin ExperimentalStUdyon他pairing with of with 阳bbib the VEGF-165乇MS Composite