低氧条件下血红素加氧酶1过表达对人肝细胞保护作用.pdfVIP

主堡胜垣苤查!Q塑生!旦筮21鲞筮!翅￡§垫』Q!型：叁!腰塾；Q塑，!尘：i!。盟!：! ·587· ．基础研究． 低氧条件下血红素加氧酶1过表达对 人肝癌细胞的保护作用 梁飞朱晓洁王秀宏 【摘要】 目的探讨低氧条件下人肝癌细胞(HepG2)中血红素加氧酶1(HO-1)过表达对细胞 的保护作用，及其与低氧诱导因子lQ(HIF—let)的关系。方法应用低氧气体(0．5％0：、94．5％N2、 5％C02)和化学模拟低氧(250ixmoL／LCoCl2)方法刺激HepG2细胞。采用逆转录聚合酶链反应(RT— PCR)方法，从mRNA水平上检测低氧条件下HO-1和HIF—ld的表达。采用Westernbolt方法，从蛋白 水平上检测低氧条件下HO-l和HIF．Id的表达及其相关性。采用四甲基偶氮唑蓝(MTr)方法，分析 低氧刺激后细胞的存活率，以及低氧刺激同时抑制HO．1蛋白表达后细胞的存活率。采用超氧化物 歧化酶(SOD)试剂盒，检测低氧刺激细胞后总SOD的活性，以及抑制HO—l蛋白表达后细胞中总SOD