氟化物对淡水硬骨鱼类,鲤属,鲤鱼肝细胞凋亡及Bcl-2,Bax蛋白表达影响.docVIP

浙江师范大学行知学院本科毕业设计(论文)外文翻译 译文： 氟化物对淡水硬骨鱼类，鲤属，鲤鱼肝细胞凋亡及Bcl-2，Bax蛋白表达的影响 Chemosphere 91 (2013) 1203-1212 摘要：鱼类直接从水中摄取氟化物，是直接受到水生生态系统氟化物污染影响的生物。此文旨在评估长期暴露在氟化物污染的水域中的鲤鱼，其肝脏组织的氧化应激，病理学变化，细胞凋亡和Bcl-2，Bax表达。结果表明，在90天的氟化物暴露实验后，肝脏组织中SOD的抑制，GSH的活力和MDA的依赖性刺激水平表明了，氟化物引起了鱼体内的氧化应激反应。显微镜检查发现，氟化物对肝脏组织和肝脏组织细胞器的损害与其暴露浓度呈正比；细胞凋亡指数与肝脏含氟量呈显著正相关；水中氟化物的含量与Bcl-2表达，Bcl-2/Bax呈负相关与Bax的表达呈正相关。我们的研究表明，鲤鱼可以承受相当高水平的氟化物暴露，但是90天后氟化物的副作用会出现在鱼类的肝脏中。在氟致病变肝脏过程中，肝细胞凋亡起了重要的决定性作用。 1.引言 氟是卤素家族的成员在环境中广泛分布。大部分的氟存在于无机或有机化合物中，它在自然界中有很重要的地位。众所周知，低浓度的氟对牙齿和骨骼的发育是很有益的，然而长期摄入过量的氟会对人类和动物产生不利的影响，例如氟骨症，也会导致植物中叶绿素和蛋白质的减少。氟化物通过自然合成和人为加工的方式进入到环境中，这些过程导致了含氟化合物在地下水和地表水中的积聚。虽然未被污染的淡水中也含有低水平的氟，其浓度却可以因肥料流失，采矿业，工业排放而增加。据报道，我国地下水氟含量的氟中毒地区为2.38 mg / L。沸水中的氟含量通常超过5 mg / L，甚至是45 mg / L。含氟工业沸水中的氟含量在96.8 mg / L，在极端的情况下可达mg / L。在中国养鱼用水主要来自自然水体，例如地下水，井水和温泉。这些水氟含量会相对高于标准对渔业可能有负面影。鱼类直接从水中摄取氟化物是直接受到水生生态系统氟化物污染影响的生物。高浓度的氟化物会导致毒性作用, 如对鱼产生抑制生长和发育增加死亡率,鳃和肝组织的病变、氟化物积累和畸形的骨组织代谢紊乱、生态压力。鲤鱼，是世界上最重要的淡水鱼繁殖物种之一，拥有最大的体型，分布最广泛，养殖历史最长，产量最高。肝脏是鲤鱼最大的消化腺，因包含许多功能而对鱼类非常重要。例如，它可以分泌胆汁，从血液中过滤不相关的物质并通过胆管排出；它可以合成人体所需的各种蛋白质，合成和分解糖原，包括维生素和激素的代谢；它也可以通过改造或结合有毒物质生成低毒或无毒物质消除或减少毒物对身体的伤害，或吸收有毒物质通过胆汁或尿液排出；巨噬细胞在肝脏中具有较强的吞噬能力，可以消除细菌、有害物质和老化的白细胞。氟化物对肝脏健康和功能的潜在负面影响现在还没有详细的调查，因此，我们研究暴露在不同氟化物浓度下，对鲤鱼细胞的抗氧化活性，脂质过氧化作用，组织病理学和细胞凋亡的影响。 2. 材料和方法 2.1 实验动物 取自太原鱼类孵化场年轻健康的鲤鱼，平均长度（12.0 ± 0.38）cm，重量（15.8±0.24）g。已经被关在实验室的鱼缸里15天，以适应实验室环境。在适应环境过程中，喂以在市场上随机买到的饲料。 2.2 氟暴露 750只健康的鲤鱼被随机分为五组，每组150只。每组再分为三小组，每小组50只。对照组曝光在不含氟的水中90天，其余四组分别曝光在浓度为40,80,120,160,mg/L的氟化钠中90天。将水质保持在如下条件下：水温，22-24℃；pH，6.8-7.2；氧容量，5-7mg/L；硬度为CaCO3，20.0 mg/L；电导率，650lS/cm。重金属浓度为零或不可能被发现，水的组成符合渔业水质标准。水每七天换一次和水族箱每七天打扫一次。使用氟离子选择性电极方法监测每个组每天的氟化物浓度，保证在7天间每个槽之间的氟化物浓度相对稳定。 解剖之前，将鱼麻醉置于冰上。在暴露后的30,60和90天时，从每组中随机挑出18条鱼将其肝脏取出收集。在准备期间将收集来的肝脏置于干冰上然后储存于-80℃直至分析酶活。在90天的曝光期后，取出一部分肝脏组织用生理盐水冲洗，然后快速固定在4%中性甲醛中待微观研究，放在2.5%戊二醛中待超微结构的研究，放在4%的多聚甲醛中待做凋亡判断和免疫组化分析。 2.3 分析过程 手机肝脏样本后，按1:10的比例加入0.86%的生理盐水并在冰上制成匀浆，4℃，1200rpm离心8分钟。制成的匀浆将被用于测定SOD，MDA，GSH的表达水平。SOD的活性用黄嘌呤氧化酶和氮蓝四唑方法测定。SOD被定义为一个单位的酶抑制率明显减少了50%。MDA含量化验使用硫代巴比土酸技术。GSH的浓度则以5，5-二硝基苯甲酸的化学方法测定