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遗 传 ! !# $ 研究报告
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猪 %/0 基因在毕赤酵母中的高效分泌表达
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黄 海 !谢 蓓 !于瑞嵩 !刘惠莉 !张德福 !
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曹祥荣 !李 震
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! 南京师范大学生命科学学院$南京 ) 上海市农业遗传育种重点实验室$上海 )
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上海市农业科学院畜牧兽医研究所$上海
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摘 要!巴斯德毕赤酵母载体质粒 KLMN 4含有强启动子 K 和 B@信号肽序列$构建猪 %/0 基因的重组质
! + # 4OP$ # !
粒 KLMN 4B%/0 $并转入 1234+Q@#%(中$得到转猪 %/0 基因工程菌$经酶切鉴定克隆到载体 KLMN 4上的外源
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基因即为猪 %/0 基因(通过电击将经 (52 酶切后线性化的 KLMN 4B%/0 质粒转化到巴斯德毕赤酵母 R@#
! $ + # !
中( 和 鉴定表达产物的结果表明$分泌于胞外的猪 蛋白分子量比猪 理论值分
)S)BK4TG U/;./-:1A,. %/0 %/0
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子量稍大$估计是糖基化的原因(表达的蛋白可发生正确的抗原 抗体反应$表达量为 * (将蛋白表达
B %I$7 7C
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上清经细胞毒性实验检测表达产物的抗病毒活性为 * (
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关键词!猪 %/0 )巴斯德毕赤酵母)基因重组)分泌表达
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中图分类号! 文献标识码!
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