中国仓鼠与草鱼体细胞融合的一初步研究.pdfVIP

债传 HFRFDITAS(Beijing)11(2)：10-121989 中国仓鼠与草鱼体细胞融合的一初步研究＊ 张锡元刘雅娟韦 萍申亢张木先郝 珊 武（汉大学生物系） 以仙合病毒作徽合处理，在所观察的分裂相中，有。．，一1％的细胞为含两种动物染色体的新型细 胞— 鼠1鱼杂种细胞。 关徽询：中国仓鼠，草鱼，细胞融合 本世纪六十年代以来，细胞融合技术的建 材 料 和 方 法 立给真核细胞遗传学的研究以巨大的动力，’白 使不同种属，甚至迸化上关系吏远的生物之间 一（）融合用亲本细胞及准备 遗传物质的转移成为可能，为研究基因和染色 中国仓鼠肺成纤维细胞 (Wg3-h)u为抗 体的行为及各种遗传学的基本问题提供了大量 氮鸟嚓岭突变型 (HGPRT-),染色体数力 的机会。1965年，好几个实验室都发现不同动 21一23条，细胞周期约12小时21〔0 物种之间的细胞融合可以产生异核体或杂种细 草鱼尾鳍细胞系 G（CCF-2)1),染色体众 胞[4.5,91。随后，许多学者对融合后杂种细胞的 数原为48草（鱼2。二48)，细胞周期为21-33 选择与分离、杂种细胞的基因表达与调节和杂 小时[al。由于在我们实验室多次传代，细胞群 种细胞的遗传学分析等方面作了一系列研究并 体中异四倍体已占多数，染色体众数为 113左 取得了重要的成果，使哺乳动物，特别是人类的 右。 基因定位研究出现了重大突破与迅速发展，并 融合用细胞的准备，将贴壁生长良好的两 为高等真核生物分子遗传学的研究开辟了新的 种细胞各两小方瓶 (25ml)，分别用0.250 途径。 酶消化后吹打均匀，分别收集计数，然后按每种 由于医学实践的要求，迄今的细胞融合研 细胞10`的量混合接种于25ml小方瓶中，用 究主要在哺乳类不同种之间进行，在哺乳类与 含20%小牛血清的RMPI-1640培养液37℃下 低等脊推动物之间的细胞融合方面，我国童弟 培养24小时，再选取生长良好的方瓶作单层融 周先生曾就仙台病毒诱导产生的金鱼囊胚细胞 合实9a. 与小鼠艾氏腹水癌细胞的融合现象作过观察研 融合以仙台病毒为融合剂，按哺乳类细胞 究[1101986年，日本学者 Ojima等首次成功地 融合的常规方法进行。融合处理后在倒置显微 将高体螃酸 (Rhodeusocellatusocellatus)原 镜下可观察到许多多核体的形成，估算融合率 代体细胞制备的微细抱与小鼠细胞融合，获得 了三个杂种细胞克隆[81［0鉴于鱼类等低等脊稚 7,hangAiyuaneaa?.:A Stu3vonSomaticCelt FusiQu BetweenHamsterandFish 动物遗传学因研究方法缺少突破及其它某些困 ＊国家自然科学基金资助课题。 难，一直是发展较缓慢的领域。为此，我们初步 1)这两个细胞系分别为复旦大学遗传所薛京伦同志及 中 国科学院武汉水生生物所魏庄；准问志所R赠i}}在此表示 研究了鼠鱼之间细胞融合产生杂种细胞的可能 谢意。 性。 宋文于19S7-41-9月23日收引， 10 为60o。 与草鱼染色体一致，这类染色体的数 目相差很 二（）杂种细胞的选择 大，有的细胞只育1-2个，一也有多达20个以上 以仙台病毒作融合处理的细胞加入含