中国人胃癌和正常组织基因组DNA中癌基因Ha-ras的限制性片段长度多态性研究.pdfVIP

遗传学报，17(2);154-160,1990 Acta GeneticaSinica 中国人胃癌和正常组织基因组DNA中 癌基因Ha-ras的限制性 片段长度多态性研究＊ 单祥年 严 明 黄 鹰 茅一萍 王世渡 南（京铁道医学院生物教研室） 赵 寿 元 复（旦大学遗传研究所） 本文报道以PHS-49为探针，分析了中国人群中36例胃癌患者癌组织和 25位正常人 体组织基因组DNA中H。一ra，基因的BamHI限制性片段长度多态性 R（FLPs)。发现了10 种不同长度的片段和18种基因型。 其中4种小于 6kb的BamHI片段是迄今国外未见报道 的，这可能是中国人群遗传多态性的一个特征。 此外，在胃癌组织中发现Ha-ra，的一些 稀有等位基因和基因型的频率明显高于正常人群。对两名胃癌患者家系中的 11名成员也 作了RFLPs分析，发现有些成员出现3条和4条限制性片段的杂合个体，表明这些个体的染 色休上含有的Ha-ras基因不只一份拷贝。对上述现象的可能原因作了分析和讨论。 鱿键词：人 H：一邝，基因，限制性片段长度多态性，家系分析，胃癌 1982年，美国的两个实验室首次从人膀胧癌细胞株中鉴定出活性癌基因Ha-ra。与 其正常的对应基因只有一个核若酸的置换，即第十二位密码子 GGC变为GTC，从而使 其编码的氨基酸从甘氨酸变为撷氨酸[16［,181o 1983年 Capon等作了Ha--ras全序列分析 证实了以上的报道1810Yuasa等1983年从人的肺癌中也发现了激活的Ha-ras癌基因20〔10 这段时间里还有其它的几个实验室也有类似的研究报道9,〔11,151。我国学者吕有勇等1986 年也在胃癌细胞株中克隆出激活的Ha--ras[1-310 近几年来国外的一些实验室用人体Ha-ras癌基因作探针，研究了正常人和各种肿 瘤患者的DNA的限制性片段长度多态性 (restrictionfragmentlengthpolymorphism, RFLP)+o,1’一“,191，发现肺癌、食道癌、卵巢癌、家族性黑色素瘤以及急粒、’漫粒、急淋和慢淋 4种白血病患者富集Ha-ras的罕见等位基因U43。但对胃癌患者的DNA的RFLPs研 究，迄今尚未见报道。 本文用人体Ha-ras基因作探针，对我国正常人和胃癌患者的基因组DNA以及2名 胃癌患者的家系进行了 RFLPs分析，试图寻找胃癌的遗传易感性标记，以及 Ha-ras等 位基因的传递规律。我们的实验结果发现了胃癌组织中富集Ha-ras稀有等位片段，并 发现了在中国人群中特有的酶切片段。 本文于 1988年4月1日收到． ＊本课题是在复旦大学遗传工程开放实验室资助下完成的． 单祥年等：中国人胃癌和正常组织基因组DNA中癌基因Ha-ras 2期 的限制性片段长度多态性研究 155 材 料 和 方 法 一（）探针的制备 EcoRI 探针为 pHS-49，这是来自人体肺癌的C-Ha-ras-1 XlzoI 基因的EcoRl6kb片段与pBR322重组的质粒 （图I)[2010 SacI SacI 参照 Brinboim快速碱变性抽提方法11［71，提取 pHS-49质 及 tEn 粒。