中华大蟾蜍染色体分带和姐妹染色体互换的研究.pdfVIP

遗 传 学 报， 10(4);291297,1983 ActaGeneticaSinica 中华大蟾蛛染色体分带和姐妹 染色单体互换的研究’‘ 温昌样2）吕群 项维 （复旦大学遗传学研究所，上海） 本文报道T中华大蟾蛛 (Bufobufogargarixans）的C带和BrdUrd-Hoechst-Giemsa复制 带，并以中华大蟾蛛为代表确立了两栖类体细胞的姐妹染色单体差别染色 S（CD）方法。 BrdUrd-Hoechst-Giemsa．技术在两栖类的中期染色体上能显示可重复的复合带型。用这种方法 我们鉴定中华大蟾蛛第10对同型染色体为 ZZ/ZW 型性染色体，所有雄性动物两个Z染色体 的复制型是完全相同的 （同步复制的），而雌性动物的Z和W染色体显示出异型复制型 不〔同 步复制的）。在W染色体长臂近着丝粒处有一个较早的复制带，Z染色体则缺乏这个复制带。 这些性染色体用C带和其他方法不能区分。此外，我们还测定了中华大蟾蛛淋巴细胞的SCE 频率，发现其 SCE频率比哺乳动物高，为 7.83士0.49(m士S.E.), 众所周知，两栖类动物的染色体数目较少，形态较大，是细胞生物学和体细胞遗传学 研究的较好的实验材料。关于两栖类染色体组型的研究已有不少报道，国内在这方面的 研究正陆续开展。吴政安Ill报道了中华大蟾赊 (B.bufogargarizans）和金线蛙 (Rana plancyi)的染色体组型之后，李树深等21〔又报道了4种蛙的染色休组型。对于两栖类染色 体分带方面的研究，也有一些报道19,10,!2,14-171。国内还曾描述了东方蝶顺(Cynopsorientalis) 和肥鲸 (Pachytritonbrevipes)的C带31〔，而无尾类的染色体分带尚未见到报道。至于两栖 类 SCE的研究，国内外至今尚无可借鉴的文献。 以上谈到的两栖类染色体分带主要指C带和银带 硝（酸银染带），而两栖类中期染色 体的复合带型 指（Q带、G带和R带）直到 1981年 Schempp和 Schmid应用改良的 BrdUrd-Hoechst-Giemsa技术19【1，才第一次获得成功。在此以前，应用Q带和G带技术，都 不能在两栖类中期染色体上显示复合带型。 原因可能是两栖类的中期染色体高度浓缩， 暗带和亮带之间的距离太小，以致不能用光学显微镜分辨18〔1。而BrdUrd-Hoechst-Giemsa 分带 B（rdUrd复制型）是建立在胸腺嚓咤脱氧核营的类似物 BrdUrd在 DNA 复制中 (S期中）能替代胸腺啥吮脱氧核昔的基础上，由于BrdUrd的掺入和DNA复制的不同 步，使中期染色体上出现可重复的复合带型。同时这些中期染色体上的复合带型真实地 反映了染色体 DNA 的复制型。 本文描述了中华大蟾赊的C带和 BrdUrd复制型 B（rdUrd-Hoechst-Giemsa分带），并 以中华大蟾赊为代表确立了两栖类体细胞的姐妹染色单体差别染色 S（CD）方法。中华 本文于 1982年7月17日收到。 1)本文是在刘祖洞教授指导下进行的，刘启兰、罗萍萍参加部分实验工作，在此一并致谢。 2)蚌埠医学院进修人员。 242 遗 传 学 报 10卷 大蟾赊是我国两栖类中分布较广泛的种群，我国29个省、市、自治区中有24个省市都有 分布[41，材料极易采得。对它的染色体进行分带，特别是复合带型的显现，将对细胞生物 学和体细胞遗传学提供更有益的帮助。中华大蟾赊姐妹染色单体差别染色 S（CD）方法 的确立，为检测环境污染因子提供了一个良好而简便的活体测试系统。 材 料 和 方 法 供试动物采自复旦大学校园内的性成熟中华大蟾赊。 C带 采用外周血培养方法制备染色体标本。血培养方法参照Wolf和QuimbyD3，和 吴政安51「的方法加以改良。培养液成份为：RPMI1640培养液 4.8m1，三蒸水或去离子 水 3.2m1，小牛血清 2m1，自制 PHA 广（东鸡子豆简便盐水法提取）0.5m1，青霉素 100单位/ml,链霉素100单位／ml。每培养瓶接种