植物胚胎学研究中石蜡切片的几种整体染色法.pdfVIP

遗传 ＿HEREDITAS(Beijing) 3(5);33-341981 植物胚胎学研究中石蜡切片的 几种整体染色法” 王 蔚 魁 （山西大学生物系，太原） 石蜡切片法应用于生物学的研究历史已 15份：乙醇50份：正丁醇35份）配制成0.1岭 久，至今仍为细胞学、组织学、胚胎学及组织化 的桔红U溶液，脱水兼复染2-3小时。 学等方面广泛应用的研究方法之一。我们在观 察小麦和玉米的受精及胚胎发育过程中摸索出 制作石蜡切片的三种整体染色方法，使常规石 蜡切片法得到了简化并且效果良好。 方 法 和 步 骤 一（）醋酸一水合抓醛一铁矾苏木精染色 1．染液的配制和使用 将2克苏木精溶 于100毫升45务的冰醋酸，配成贮备液A;0:5 克铁明矾溶于100毫升45％的冰醋酸，配成贮 图1小麦子房经醋酸一水合氯醛一铁矾苏木精染色制成的片于 备液BoA,B两液分别贮藏备用。使用前一天 将A液与B液等量混合，然后每，毫升中溶人 二（）孚尔根反应 2克水合氯醛，即为染液。放置久了的染液容 1按‘常规方法配制试荆。 易产生沉淀和使细胞质着色，故用配制后 2- 2．染色与制片 1（)材料经固定后在 14天的新鲜液为好。 在染色过程中不需媒染 70多酒精中保存备用。(2）经蒸馏水浸洗后浸 和分色。整体染色时间一般为 12-24小时，但 于1NHCI中20分钟，再移到60℃的1NHCl中 持续染3-4天亦无妨。 水解8-10分钟。(3）经蒸馏水浸洗2小时后， 2．染色与制片 （1)材料经固定 按（需要 用席夫试剂染色3小时以上。(4)用漂洗液换 选用固定液）后在70关酒精中保存备用。 (2) 液漂洗1Q小时左右。，（）按常规石蜡切片法制 用蒸馏水浸洗后浸于1NHCl中20分钟。然 片 （图?)o 后在60℃的1NHCl中水解8-10分钟。(3) 整体材料在脱水过程中可用固绿复染，即 蒸馏水浸洗2小时后在醋酷卜水合氯醛一铁矾苏 用95外酒精或III级浓度的正丁醇脱水剂，配 木精中染色12-24小时。(4）用水稍加冲洗后 成0.1％的固绿溶液，脱水兼复染2-3小时。 按常规石蜡切片法脱水制片。 WangWeikui:SeveralMethodsofStainingtheWho- 制成的片子染色倩晰 （图1)，一般不需复 leinParaffin Preparation forPhytoetnbryologicalRese- 染。 若要复染时，整体材料在脱水过程中用 arch 1)此文曾请李愁学、杨弘远和郝水等老师的审阅和指正，照 95多酒精或III级浓度的正丁醇脱水剂 蒸（馏水 片由丁葆祖同志帮助拍摄，谨表示感谢。 ．33 房等整体材料的细胞核内的染色体、染色质和 核仁以及细胞质内的质体染成深蓝色，而细胞 质基本不着色。该染液是我们由冰醋酸代替了 丙酸一水合氯醛一铁矾苏木精E13［染液中的丙酸配 制而成的，＿它保持了原染液不需媒染和分色的 优点，并且增加了染色的清晰度。染色之前对