质粒的复制特性和整合后在发动大肠杆菌染色体复制中对recA基因的依赖性的研究1).pdfVIP

遗 传学 报，17(1);53-62,1990 A4cto Cenetica Sinica 质粒的复制特性和整合后在发动大肠杆菌染色 体复制中对recA基因的依赖性的研究，‘ 毛裕民 卢见微 盛祖嘉 （复旦大学遗传学研究所，上海） 大肠杆菌的温度敏感的DNA复制发动突变型dnaA46在42℃中不能生长而形成菌落， 质粒或噬菌体的格合使它能生长。前文[2]报道了F质‘粒整合后所发动的染色休复制依赖丁； recA基因。本文报道5种质粒和2种噬菌体整合后所发动的染色体复制对 recA 基因的依 赖性的研究结果。实验结果说明，依赖与否和它们在游离状态中复制方向无关，从而否定了 recA 基因的作用是把质粒或噬菌体的游离状态的单向复制发动机构改变为整合状态的双向 复制发动机构这一假设。 关键词：整合抑制，DNA复制，recA基因 大肠杆菌 (Escherichiacoli)的染色体有一个固定的复制起点和一个固定的复制 终点，它们分处在环状染色体的相对位置上。复制终点并不是单纯的两个复制叉相遇的 位置，而是具有阻碍复制叉前进的作用的核普酸序列4,〔10。单向的复制对于具有这样一种 一结构的染色体来讲，即使不是不可能的，至少是不利的。大肠杆菌的染色体复制确实是双 向的。 大肠杆菌的温度敏感的 DNA复制发动突变型 dnaA46在42℃中不能形成菌落， 质粒的整合使它能在42℃中形成菌落。Fp质粒整合到dnaA46的染色体上后，在420C 一中染色体复制由FI质粒发动，这种染色体复制依赖于 ，ecA 基因21〔0pLN质粒,pBR322 的衍生质粒、噬菌体 PZsig5等在游离状态进行单向复制，而在整合状态却发动染色体的 双向复制6,〔7,177。 因此 ，ecA 基因的作用可能是使游离状态的单向复制发动机构改变为 整合状态中的双向复制发动机构。如果这一假设是符合实际的话，应该预期游离状态进 一行单向复制的质粒或噬菌体整合后所发动的染色体复制依赖于，ecA基因，而游离状态 进行双向复制的质粒或噬菌体整合后所发动的染色体复制将不依赖于 ：ecA基因。本文 报道游离状态中进行单向的或双向复制的几种质粒和噬菌体在整合状态中听发动的染色 体复制对 ；ecA基因的依赖性的研究结果。 材 料 和 方 法 一（）菌株、质粒和噬菌体 所用的菌株全部是E.coliK-12的衍生菌株，它们的 基因型和来源见表 1,,mini一染色体质粒 pEM120带有大肠杆菌染色体的复制起点和卡 本文于 1988年6月9日收到。 1)国家自然科学基金资助为课题。L.Caro,S.,Yasuda,T.Kogoma,N.Schaus,L.Koppes,J.R.Scott, K.Nordstrom,R.DAri和M.Meijer提供菌株和质粒。本校 1986届大学四年级学生鲍征征和1987届大 学四年级学生吴晓华参加部分实验工作，在此一并致Mo 54 遗 传 学 报 17卷 那霉素抗性基因〔‘。质粒pBEU34带有一个recA十基因和一个氨苯西林抗性基因。所 用的质粒和噬菌体见表 20 农 1细菌菌株 Tablel Bacterialstrains 菌株 基 因 型，” 来源或参考文献 Strain Genotype Sourseorreference LC381 F-draA46thyAleuA(proBlac)rpsL Caro,L. SY478 HfrKL16srl::Tn10recA56thi Yasuda,S. XAC A(lacpro)riffno!areargE(Am)