中国3个地区汉族人群补体C6的遗传多态性研究.pdfVIP

遗传学报，17(3);24324851990 浦ctaGeneticaSinica 中国3个地区汉族人群补体C6的 遗传多态性研究’‘ 张 诱 柱若甫 （中国科学院遗传研究所，北京） 运用聚丙烯酞胺凝胶等电聚焦 (PAGIF）和免疫吸引技术，研究了3个地区汉族人群两 C6多态性。得到的基因频率如下：漳州市— C6*A:0.4634,C6*B:0.5000,Cl5*R-: 0.0366(C6*B2:0.0317)；成都市一 C6*A:0.49755C6*B:0.4484,C6＊R:0．0545(0-6 ＊B2:0.0395)；哈尔滨市— C6*A:0.47085C6*B:0.5219,C6*R:0.0073 (C6*82： 0.0073)。蒙古人种的C6*A频率一般都低于0.5，高加索人种的C6*A频率一般都高于 0.成 黑人则介于两者之间。蒙古人种与高加索人种的另一个区别在于前者的C6*B;频率 在。.03到0.07之间，而后者几乎没有 C6*B2o 关键词：补体第六成分 C（65）人类群体遗传学，遗传多态性，汉族 1975年Hobar：等人首先报道了人补体第六成分 C（6）的遗传多态性[l}0并隆测了 高加索人、东方人及黑人的基因频率。还结合家系方法研究了C6的遗传规律。1976年 Podack等人首次成功地分离出有溶细胞活性的C6，并测定了它的理化性质[zaa此后， Whitehaus。和Putt],Tokunagalt，以及Nishimura[s3，等人先后对C6的分型方法进 行了改进。 目前人们已对许多人群C6基因频率及变异型进行了深人地研究[5s［,ti,t2]并对建康人 和某些病人进行了对照研究，以期发现基因型与疾病的关系191［。因此，掌握人群中C6多 态性资料对遗传学研究、临床医学和法医学研究都具有重要意义。但目前对国呐人群C6 的多态性研究甚少，仅一日本实验室1986年报道了两个汉族人群的基因频率[}3aa本文作 者于1987年在以下各地区汉族人中取样，有福建省漳州市205人·、四川省成都市202人 和黑龙江省哈尔滨市137人，进行了C6多态性研究，得到了各人群的基因频率。通过与 其他人种的比较指出各人种间的差别。另外还检测出一些变异型。 材 料 与 方 法 一（）取样 取受试者静脉血2ml，加人少许抗凝剂EDTA摇匀，通过离心将血浆与红细胞分 开，并将血浆贮存在一70℃备用。 二（）制板 本文于1988年4月26日收到。 1)本工作得到金锋、赵红、胡交宇等同志的热情帮助，在此一并致谢。 244 遗 传 学 报 17卷 先将0.5g牛黄酸溶于8.5ml双蒸水中，再依次加入聚丙烯酸胺单体 2（9.1%，W/V) 3m1,聚丙烯酞胺双体 0（.9外，W/V)3rnl，四甲烯二胺1211,AmpholinpH58 (LKB)Iml和核黄素 (4mg八00ml)0.5mla混匀后注人到24cmX11.5cmx0.05cm 的玻璃模具中，在8瓦日光灯下照1-2小时，使其聚合。聚合后，放到斗℃冰箱中保 持4小时以上再使用。 三（）电泳 拆开模具，使胶板附在玻璃板上，让玻璃板另一面与冷却板贴紧。在相应于电泳仪阳 极和阴极的地方分别放上浸有1mol/LH3P04和0.2NNaOH 的电极条。在800V下预 电泳半小时，使电流降到8mA以下。用加样纸 2（mmX8mm)沾上血浆，放到靠阳极 一边，在1000--1200V电压下等电聚焦两小时，使电流降到5mA左右即可。 （四）被动转移 将硝酸纤维素薄膜在 PBS中浸透，放到电泳胶上。薄膜宽5cm，一边靠阴极。上面 依次放上两层滤纸，多层吸水纸，玻璃板及lkg重物，吸印半小时，其间如果吸水纸湿透就 要更换。到时间后，将滤膜取下。如粘有凝胶就在 PBS中洗净，放到含3拓的牛血清白 蛋白 B（SA)的PBS中过夜4（CO)。这样，没有吸印到蛋白的地方就被BSA盖满。 五（）免疫检测 取出